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目的:比较具有相同遗传背景、不同肝转移潜能的人胰腺癌细胞株L3.6 pl和Colo-357的分泌蛋白质谱的差异,筛选及鉴定与胰腺癌肝转移相关的分泌蛋白质,为阐明胰腺癌定向肝转移机制、寻找胰腺癌肝转移早期诊断、预后判断及药物治疗新靶点提供理论依据。
方法:应用双向电泳技术分离一对来自同一亲本、具有不同肝转移潜能的人胰腺癌细胞株L3.6 p1和Colo-357的分泌蛋白质,图像分析软件筛选出两者差异表达的蛋白质点,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对部分差异蛋白点进行鉴定。利用Western blot印迹法检测差异分泌蛋白质组织蛋白酶D前体、表皮型脂肪酸结合蛋白在两株细胞中的表达水平。
结果:建立了L3.6 pl和Colo-357细胞分泌蛋白质的双向电泳图谱,识别出差异表达的蛋白质点20个,质谱鉴定出5个蛋白质点,其中组织蛋白酶D前体、表皮型脂肪酸结合蛋白在高肝转移潜能细胞株L3.6 pl中的表达水平高于低肝转移潜能细胞株Colo-357,而视黄醛脱氢酶1、二磷酸核苷激酶B、膜连蛋白A1在L3.6 p1细胞株中的表达水平低于Colo-357细胞株。Western印迹法分析证实了组织蛋白酶D前体和表皮型脂肪酸结合蛋白在L3.6 pl和Colo-357细胞分泌蛋白质中的差异表达水平与比较蛋白组学研究结果一致。
结论:高、低不同肝转移潜能的胰腺癌细胞株分泌蛋白质的表达存在明显差异,两者间的差异蛋白可能与胰腺癌肝转移密切相关,胰腺癌肝侵袭转移的特性可能是诸多蛋白共同作用的结果。