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本文针对赞皇枣黑腐病进行病原菌的分离回接、生物学特性、以及拮抗菌株的多重筛选研究,明确了主要的致病菌,并筛选获得了具有研究应用价值的拮抗放线菌AC01、AC07和拮抗芽孢杆菌B01、B07。同时,还对获得的拮抗菌进行了发酵培养基和发酵条件优化。结果如下：1.连续三年(2011-2013)赞皇枣黑腐病病菌分离、回接试验表明：茎点霉菌(Phoma sp.)和链格孢菌(Alternaria sp.)的平均分离率分别为35.67%和40.00%,且这两株菌均为赞皇枣黑腐病的主要致病菌。2.茎点霉菌(Phoma sp.)生物学特性为：SCS培养基为菌丝生长最适培养基,葡萄糖和尿素分别为最佳碳、氮源；最佳生长条件pH6-9,24℃,持续黑暗。PDA培养基为分生孢子产生的最适培养基,甘油和硝酸铵为最适碳、氮源；最佳产孢条件为pH8,32℃,光、暗交替。3.链格孢菌(Alternaria sp.)生物学特性为：PDA培养基为菌丝生长最适培养基,葡萄糖和尿素分别为最佳碳、氮源；最佳生长条件为pH6-10,24-32℃,光暗交替或持续黑暗。PDA培养基为分生孢子产生的最适培养基,甘油、甘露醇为最适碳、氮源；最佳产孢条件为pH10,28℃,持续黑暗。4.以茎点霉菌(Phoma sp.)为靶标的多重筛选结果表明：芽孢杆菌B01和放线菌AC01抑菌效果显著,持效性好。菌株B01的最优发酵培养基为：蔗糖20g/L、花生粉26g/L、酵母粉5.5g/L、KH2PO4 0.3g/L、MgSO40.2g/L、CaCO40.4g/L、MnSO40.02g/L、FeSO40.02g/L;最佳发酵条件为：种子液浓度1.5-2x107-108cfu/ml时,接种量4%(V/V),装液量20ml/250ml三角瓶,原始pH值6.0,发酵温度24℃,发酵时间48h。菌株AC01的最优发酵培养基为：高粱粉42g/L,大豆粉12g/L,(NH4)2SO43.7g/L, CaCO43.2g/L, NaC11.7g/L,酵母粉2.0g/L；最佳发酵条件为：种子液浓度1.5-2x107-108cfu/ml时,接种量3%(V/V),装液量50ml/250ml三角瓶,原始pH7.0,发酵温度28℃,发酵时间108 h。5.以链格孢菌(Alternaria sp.)为靶标的多重筛选结果表明：芽孢杆菌B07和放线菌AC07抑菌效果显著,持效性好。菌株B07发酵的最优培养基为：红薯粉2.0g/L,牛肉膏10g/L, NaC11Og/L, MnSO40.02g/L;最佳发酵条件为：种子液浓度1.5-2x107-108cfu/ml时,接种量5%(V/V),装液量40ml/250ml,原始pH值7.0,发酵温度32℃,时间72h。菌株AC07的最优发酵培养基为：麦芽糖57g/L,大豆粉27g/L,(NH4)2SO41.7g/L, CaCO42.2g/L, NaC11.7g/L,酵母粉2.0g/L；最佳发酵条件为：种子液浓度1.5-2x107-108cfu/ml时,接种量2%(V/V),装液量40ml/250ml三角瓶,原始pH7.0,发酵温度28℃,发酵时间108h。