【摘 要】
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目的及意义:本试验使用雪白睡莲花(Nymphaea candida,N.candida)作为材料,采用响应面分析法结合超声波辅助提取法对雪白睡莲花中总黄酮(Total flavonoids from Nymphaea Candida,NCTF)的醇提工艺和雪白睡莲花中粗多糖(Crude polysaccharides from Nymphaea Candida,NCCP)的水提醇沉工艺进行研究分析
【基金项目】
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“新疆维吾尔自治区自然科学基金项目”部分研究成果(项目编号:2018D01B19)项目主持人:刘丹丹 讲师; “2018年南京农业大学-新疆农业大学联合基金项目(H)”部分研究成果(项目编号:18NN-XNLHJJ)项目主持人:刘丹丹 讲师; “新疆农业大学校前期项目”部分研究成果(项目编号:XJAU201716) 项目主
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目的及意义:本试验使用雪白睡莲花(Nymphaea candida,N.candida)作为材料,采用响应面分析法结合超声波辅助提取法对雪白睡莲花中总黄酮(Total flavonoids from Nymphaea Candida,NCTF)的醇提工艺和雪白睡莲花中粗多糖(Crude polysaccharides from Nymphaea Candida,NCCP)的水提醇沉工艺进行研究分析;并通过构建金黄色葡萄球菌性小鼠乳腺炎模型,探索雪白睡莲花中总黄酮及粗多糖的体内抑菌抗炎效果,研究结果为新疆地方药材雪白睡莲花有效成分的进一步研究以及奶牛乳腺炎新型药物的开发提供数据支持。方法:用雪白睡莲花总黄酮/粗多糖的得率作为考察的标准,采用超声波辅助提取,分别考察(乙醇浓度、超声功率、提取时间、料液比、提取温度)/(料液比、提取温度、超声功率、提取时间、提取次数)五个单因素对雪白睡莲花总黄酮/粗多糖的得率的影响,选择影响最显著的因素进行响应面分析,确定出雪白睡莲花总黄酮/粗多糖得率最高的提取条件。将75只分娩3~10 d的昆明小鼠,随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、雪白睡莲花总黄酮组、雪白睡莲花粗多糖组,每组15只共5组。除了空白对照组,其余各组注射金黄色葡萄球菌构建小鼠乳腺炎模型,造模成功后各组分别灌胃生理盐水、0.13 g/kg环丙沙星、0.5 g/kg雪白睡莲花总黄酮、0.5 g/kg雪白睡莲花粗多糖,每天2次,连续给药7 d,空白对照组不做处理。分别在给药3、5、7 d检测各试验组乳腺组织中细菌的数量,TNF-α及IL-6的含量,同时观察小鼠乳腺病理组织学变化。结果:(1)单因素分析影响雪白睡莲花中总黄酮得率最显著的3个因素分别为乙醇浓度、超声功率、提取时间。经响应面分析可确定雪白睡莲花中总黄酮最佳提取条件:提取温度、料液比、乙醇浓度、提取时间、超声功率分别设定为60℃、1∶30 g/m L、81%、20 min、60%;雪白睡莲花中总黄酮得率可达12.00%。(2)单因素分析影响雪白睡莲花中粗多糖得率最显著的3个因素分别为料液比、提取温度、超声功率。经响应面分析可确定雪白睡莲花中粗多糖最佳提取条件:提取时间、提取次数、料液比、提取温度、超声功率分别设定为30 min、2次、1∶14 g/m L、57℃、70%;雪白睡莲花中多糖得率可达51.78%。(3)与空白对照组对比,模型组小鼠精神较差、饲料和水消耗量减少;乳腺组织中有许多的红细胞和炎症细胞;乳腺组织中金黄色葡萄球菌的数量、TNF-α和IL-6极显著升高(P<0.01)。与模型组对比,阳性对照、雪白睡莲花总黄酮组、雪白睡莲花粗多糖组小鼠精神状态、饲料和水消耗量逐渐恢复;乳腺组织中的炎症细胞和红细胞明显减少;乳腺组织中金黄色葡萄球菌的数量、TNF-α和IL-6极显著降低(P<0.01)。结论:雪白睡莲花总黄酮最佳工艺条件:提取温度60℃、料液比1∶30 g/m L、乙醇浓度81%、提取时间20 min、超声功率60%;雪白睡莲花粗多糖最佳工艺条件:提取时间30 min、提取次数2次、料液比1∶14 g/m L、提取温度57℃、超声功率70%。雪白睡莲花总黄酮/粗多糖能够改善金黄色葡萄球菌性小鼠乳腺炎模型乳腺组织的损伤,同时具有显著的体内抑菌抗炎作用。
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