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背景和目的:
中枢神经系统感染常见病原体主要有细菌、真菌、病毒、寄生虫、螺旋体等。中枢神经系统是一个相对封闭且有其自身内部动态平衡的系统。正常生理情况下,可以限制各种致病因子侵犯中枢神经系统。当一旦被病原体侵入,其临床表现危重,致死率和致残率高。结核性脑膜炎、隐球菌性脑膜炎、病毒性脑膜炎是常见的三种中枢神经系统感染。
结核分枝杆菌杆菌和病毒都是胞内寄生的病原体,宿主主要通过Th1诱导的细胞免疫进行免疫防御。真菌的主要免疫途径也是Th1介导的细胞免疫。IL-12、IFN-γ是Th1免疫的主要细胞因子。Th1主要由IL-12诱导分化,IFN-γ是Th1产生的效应因子。近年来通过对自身免疫病的研究,发现了一种新的以产生IL-17为主要效应因子的CD4+T亚群-Th17,IL-23促进Th17的增殖与分化。国外很多学者通过动物实验证实了Th17免疫途径在结核分枝杆菌感染的免疫反应中起到了重要作用。部分学者对真菌感染也进行了Th17免疫途径的研究,认为其也参与了真菌感染的免疫反应。Th17途径在病毒感染中的研究也有零星报道,但对于Th17途经在病毒感染中的研究尚无一致结论。
目前的研究提示IL-23、Th17、IL-17在这些病原体感染尤其是结核分枝杆菌感染中起到了至关重要的作用。但目前对于IL-23、Th17、IL-17在结核分枝杆菌和真菌感染中的免疫作用的研究结论大多基于动物实验和外周病变,缺少临床方面和中枢神经系统感染等方面的研究。国内目前只有徐国荣进行过IL-23在结核性脑膜炎患者脑脊液中的水平测定。
因此我们的实验目的:(1)收集各组中枢神经系统感染患者的临床资料,探讨临床鉴别点。(2)通过中枢神经系统感染患者与非感染性疾病患者脑脊液中的IL-23、IL-17水平测定,证实IL-23、IL-17有无参与到中枢神经系统感染的免疫当中。(3)比较各组中枢神经系统感染患者脑脊液中IL-23、IL-17是否存在水平差异,对于临床中枢神经系统感染的鉴别诊断有无作用。(4)测定各组中枢神经系统感染患者的脑脊液中IL-12和IFN-γ的水平并比较有无差异。(5)讨论IL-23、IL-17与各种影响因素(病程、脑脊液指标、IL-12、IFN-γ)的相关性。
研究对象:选取2008年2月至2009年12月在中山大学附属第三医院住院治疗的中枢神经系统感染患者112例,其中结核性脑膜炎患者52例,隐球菌脑膜炎患者11例,病毒性脑膜炎患者49例。均不合并自身免疫性疾病。以及同期在我院住院的非中枢神经系统感染性疾病及非自身免疫疾病患者36例作为对照组。
方法:
1.收集脑脊液。
2.采用ELISA方法检测患者脑脊液中的IL-23、IL-17、IL-12、IFN-γ的水平。
3.收集病例组和对照组的临床资料。
4.数据资料使用SPSS13.0统计分析软件进行运算,利用各种参数对比,相关性分析等进行分析。
结果:
1.病例组临床资料的比较
病毒性脑膜炎组患者以抽搐或神志改变或精神行为异常起病多于TBM组患者(p=0.003),但整个病程中这三类症状出现的阳性率在三种疾病之间没有明显差异。隐球菌脑膜炎组患者呕吐出现率多于结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎组患者(P<0.05)。在脑脊液比较中,结核性脑膜炎和隐球菌脑膜炎组患者出现脑脊液压力增高、外观改变、白细胞升高、微量蛋白升高、葡萄糖降低、氯化物降低的阳性率均大于病毒性脑膜炎组患者(P<0.05)。隐球菌脑膜炎组患者脑脊液压力升高的人数比例和升高的程度均较结核性脑膜炎组患者高(P<0.05),但微量蛋白含量较结核性脑膜炎患者低(P=0.012)。在头颅MRI的比较中,结核性脑膜炎与隐球菌性脑膜炎组患者脑膜、脑实质受累的情况没有明显区别,但结核性脑膜炎组患者出现脑膜强化的阳性率大于病毒性脑膜炎组(P=0.005)。
2.脑脊液中IL-23、IL-17、IL-12、IFN-γ的水平及相关性分析
IL-23在中枢神经系统感染患者中的测定结果不理想。IL-17在结核性脑膜脑炎、隐球菌性脑膜炎、病毒性脑膜炎组患者脑脊液中的水平均高于对照组(P<0.01)。三组中枢系统感染患者脑脊液的IL-17水平不同,由高到低依次是隐球菌脑膜炎组、结核性脑膜炎组、病毒性脑膜炎组(P<0.01)。结核性脑膜脑炎组和隐球菌脑膜炎组患者脑脊液中的IL-12、IFN-γ的水平较病毒性脑膜炎组和对照组患者明显增高,且结核性脑膜炎组患者的水平高于隐球菌脑膜炎组的患者(P<0.05)。对结核性脑膜炎组患者脑脊液中的IL-17、IL-12、IFN-γ进行相关性分析,发现IL-17与IL-12呈负相关(r=-0.311,P<0.05),同时把这三类细胞因子与脑脊液白细胞数做相关分析,均显示呈正相关(r=0.219,0.434,0.341;P<0.05)。利用脑脊液中IL-17的水平,建立结核性脑膜炎和隐球菌性脑膜炎、结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎、结核性脑膜炎和对照组的ROC曲线,曲线下面积分别是0.9460.751和0.83,Youden指数分别是0.749、0.41和0.543。
结论:
1.中枢神经系统感染患者的临床症状、脑脊液分析、影像学有助于疾病的鉴别诊断。
2.Th17免疫途径参与了中枢神经系统感染的免疫应答。且与Th1途径相互影响。
3.各种中枢神经系统感染患者脑脊液中IL-17水平不同,有助于鉴别诊断。