【摘 要】
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目的1.探讨长链非编码RNAs(lncRNAs)和mRNAs在LDH模型大鼠室旁核内的表达情况。2.高通量基因测序结果分析。3.差异性表达lncRNAs和mRNAs的验证以及生物信息学预测。方法1.通过苏州大学动物中心采购,使用200g到220gSD雄性大鼠,麻醉后手术暴露大鼠腰5、6左侧神经根,取大鼠自体近端尾椎正常的髓核组织放置在其表面,构建LDH大鼠动物模型。分别在手术前1天,手术后第3、7
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目的1.探讨长链非编码RNAs(lncRNAs)和mRNAs在LDH模型大鼠室旁核内的表达情况。2.高通量基因测序结果分析。3.差异性表达lncRNAs和mRNAs的验证以及生物信息学预测。方法1.通过苏州大学动物中心采购,使用200g到220gSD雄性大鼠,麻醉后手术暴露大鼠腰5、6左侧神经根,取大鼠自体近端尾椎正常的髓核组织放置在其表面,构建LDH大鼠动物模型。分别在手术前1天,手术后第3、7、14、21、28和35天检测SD大鼠的机械痛和热痛阈值。2.通过高通量基因测序技术检测室旁核组织中lncRNAs及mRNAs基因表达3.qPCR和Western Blotting验证高通量基因测序结果。结果1.显微镜下自体尾椎椎间盘髓核(NP)移植能够显著降低LDH模型大鼠后肢的机械痛及热痛阈值。2.高通量基因测序结果分析发现,LDH组和假手术(Sham)组之间lncRNAs和mRNAs基因表达图谱在术后第7天差异明显。其中,共有322个差异表达的lncRNAs(124个上调,198个下调)和166个差异表达mRNAs(77个上调,89个下调)。3.qPCR和Western Blotting验证结果与基因测序结果表现出较好的一致性,证实本研究中高通量基因测序技术结果的可靠性。结论1、研究结果表明,LDH大鼠室旁核内lncRNAs表达确实存在差异。检测到322个差异表达的lncRNAs与166个差异表达的mRNAs。这些lncRNAs可能调节部分相关蛋白和基因的表达,并在根源性疼痛的发病机制中发挥关键作用。我们的研究为探索神经病理性疼痛的潜在治疗靶点提供了重要的信息。2、LDH模型大鼠室旁核内P2X2、Kcnip3、Avp、BDNF可能参与了 LDH的疼痛中枢敏化。
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