已知miRNA参与调控鸡肌内脂肪沉积。鸡作为我国重要肉类食品来源,其肌内脂肪沉积相关的miRNA表达谱、miRNA间互作调控等研究还比较缺乏。所以,为了全面了解鸡肌内脂肪沉积过程miRNA的调控功能,本研究分析了中国地方品种固始鸡6、14、22、30周龄胸肌肌内脂肪沉积规律,构建了四个发育阶段胸肌小RNA文库。通过Illumina Sequencing技术检测了四个发育阶段的miRNA表达谱,鉴定了肌内脂肪沉积相关miRNA,并对这些miRNA表达情况和潜在功能进行了全面分析和预测,在细胞水平对其中的两个关键miRNA(miR-15a,miR-124a-3p)进行功能验证。上述研究获得以下主要结果1.固始鸡22周龄前胸肌肌内脂肪合成速度实际较慢,22周龄后合成速度较快,固始鸡胸肌肌内脂肪沉积量与肌纤维直径的长度呈明显的负相关,这种特征与其生长特性相一致。2.由四个发育阶段胸肌组织miRNA测序数据共鉴定到388种已知miRNA和31种新的miRNA,其中有92个差异表达;有260种miRNA分别归属于106个家族,其余176种i RNA则没有明确的基因家族定义,其中有9个家族仅存在于鸡中。通过生物信息学分析共鉴定了22个和脂肪代谢相关的差异表达miRNAs,并构建了和脂肪代谢相关的miRNA-m RNA调控网络3.在鸡成纤维细胞和固始鸡胸肌前脂肪细胞中过表达miR-15a能够抑制其预测靶基因ACAA1、ACOX2、SCP2、ELOVL5和ABCD3的m RNA表达,miR-15a与ACAA1、ACOX1、SCP2存在直接靶向关系,并且能从蛋白水平抑制ACAA1,ACOX1的表达。过表达miR-15a能够促进胸肌前脂肪细胞分化和脂滴的形成。4.鸡miR-124a-3p为一个广泛性表达miRNA,呈现明显的组织特异性和时序性表达,这和miR-124a-3p的功能预测结果一致。在鸡脂类代谢和脂肪沉积的主要组织,miR-124a-3p可直接靶作用于ACAA2基因。