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目的:通过建立犬急性胰腺炎的模型并用骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell-Derived Moleculesin,BMSC-CM)对其进行治疗,探究骨髓间充质BMSC-CM对犬急性胰腺炎的临床治疗效果,为临床运用骨髓间充质BMSC-CM治疗犬急性胰腺炎打下基础。方法:(1)建立犬急性胰腺炎模型选用24只健康中华田园犬,分为对照组(n=6)和模型组(n=18)两个组,模型组采用5%牛黄胆酸钠(0.1ml/kg)和重组胰蛋白酶(3500U/Kg)混合后经副胰管逆行注射的方法建立犬AP模型,对照组采用0.5%NACL以相同剂量经胰胆管逆行注射法造模。造模后检测白细胞(White Blood Cell,WBC),C反应性蛋白(C-reactive protein),血清淀粉酶(serum amylase,AMY),脂肪酶(Lipase,LIP)水平,结合爱德士犬胰腺炎快速检测板进行判定。(2)分组治疗及指标采集造模后对照组为A组,模型组再随机分为B,C,D三组。A组进行常规治疗(痛立定,5%葡萄糖生理盐水+肌酐+辅酶A+三磷酸腺苷+维生素C,生理盐水+注射用氨苄西林钠);B组进行常规治疗(同A组治疗方法),C组在常规对症治疗的基础上增加BMSC-CM,D组在常规对症治疗的基础上增加乌司他丁。各组于治疗后1、3、5、7、10、15天,观察记录临床症状的变化情况,检测WBC、CRP、AMY、LIP的浓度变化;于治疗后第15天进行B超检查和病理剖检以及组织切片HE染色进行组织学观察。得到数据用SPSS22.0版本软件进行统计分析。试验结果:(1)模型建立结果采用5%牛黄胆酸钠(0.1ml/kg)及重组胰蛋白酶(3500U/kg)混合液副胰管逆行注射的方法建立模型,注入造模剂后胰腺结缔组织薄膜立即明显充盈水肿、组织开始出血;造模5min后,胰腺肿大呈深紫色带状出血。A组以同等剂量的0.5%NaCl经胰胆管逆行注射后胰腺仅发生轻微水肿未出现组织出血情况。术后12h模型组出现呕吐,腹泻,食欲废绝,腹痛弓背等临床症状,有3只犬出现“祈祷式”姿势。术后12h A组除CRP在轻度炎症范围外其他各项指标仅在正常范围内小幅度波动,模型组WBC,CRP,AMY,LIP结果均超过正常范围,AMY,LIP上升至正常范围三倍左右,与A组差异极显著(P<0.01),爱德士犬胰腺炎快速检测板进行检测,A组为阴性结果,模型组为阳性结果。提示造模成功。(2)分组治疗结果临床变化:A组治疗第1天出现腹痛、略微软便的情况,触诊腹壁轻微紧张,第3天恢复正常一直到试验结束。B组未采取药物治疗第1天开始出现呕吐,腹泻且粪便为血便,腹痛,触诊腹壁较紧张,未采取药物治疗的第3天便有试验犬开始出现发热症状,未采取药物治疗的第五天有患犬出现“祈祷式”姿势,并且有休克现象发生,第七天休克犬自然死亡。此期间该组大部分试验犬精神都较为沉郁,有部分犬精神好转,但在试验结束后并未自然恢复。C组治疗第一天症状与B,C组无显著差异,于治疗第3天腹痛现象明显减轻,食欲良好,治疗第3天呕吐腹泻停止,治疗第5天临床症状消失,与术前差异不显著。D组术后治疗第1天出现呕吐,腹泻,腹痛,触诊腹壁极度紧张,患犬精神沉郁食欲废绝,治疗第3天患犬食欲恢复,但仍然存在呕吐腹泻等情况,有患犬出现发热症状,经治疗第五天好转,治疗第7天大部分症状消失,腹壁触诊略微紧张,其余临床症状消失。WBC变化:BMSC-CM组临床症状消失平均时间为5天,乌司他丁组临床症状消失平均时间为7天,C,D两组临床症状消失时间差异及显著(p<0.01)。BMSC-CM组WBC于术后开始上升,于治疗第3天达到峰值,随后开始下将至治疗第7天恢复正常范围,与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。乌司他丁组WBC于治疗第3天达到峰值,后开始下降,于治疗第10天恢复正常范围与BMSC-CM组存在极显著性差异(P<0.01)。CRP变化:BMSC-CM组CRP于术后12h开始上升,于治疗第1天达到峰值,后开始下降于治疗第7天恢复正常于对照组相比无显著性差(P>0.05)。乌司他丁组CRP于术后12h开始上升,治疗第3天到达峰值,后保持稳定下降趋势,于治疗第10天恢复正常范围但与A组比较仍然存在显著性差异(P>0.05)。B组CRP于造模12h后开始升高至治疗第7天达到峰值,后开始下降至治疗10五天仍然高于正常范围,与A组存在极显著差异(P<0.01)。AMY变化:BMSC-CM组AMY于术后12h上升至正常值3倍左右,于治疗第1天到达峰值,至治疗第7天恢复正常范围内,治疗第15d与A组比较无显著性差异(P>0.05)。乌司他丁组于治疗第1天达到峰值与C组无显著性差异(P>0.05),于治疗第15天恢复正常范围,但与A组相比仍然存在显著性差异。LIP变化:BMSC-CM组LIP于术后开始升高,术后第3天达到最高峰,后开始下降于第7天恢复正常范围。乌司他丁组于术后第5天到达最高峰,与BMSC-CM组存在极显著差异(P<0.010)。超声扫查结果:治疗15天超声扫查,A组可见十二指肠肠壁结构清晰,分层完整,胰腺厚度约0.6cm左右,回声均质,结构清晰,可见胰腺被膜。为B组可见十二肠壁分层变模糊,肠壁见出现断层,提示为胃溃疡,同时可见浆膜层增厚,肠系膜回声增强提示腹膜炎,周围无回声部分提示存在腹水,或出血,胰腺厚度约1.35cm,回声不均质,被膜不可见,有较多钙化灶及液性暗区提示为出血性急性胰腺炎。C组可见十二指肠分层较B组清晰,胰腺厚度约0.84cm,胰腺有少量钙化灶形成,胰腺被膜可见但没有A组清晰,腹膜及腹腔器官形态正常D组显示十二指肠肠壁分层不清晰,胰腺被膜粗糙不可见,胰腺组织增大有较多钙化灶,大网膜回声增强提示有钙化存在。病理剖检:治疗15天可见,A组胰腺恢复正常均质粉白色,B组可见胰腺组织严重出血坏死,胰腺原本的结构及颜色完全消失。C组可见胰腺结构完整,较正常胰腺相比厚度略微增厚,胰腺右叶有小部分钙化,颜色粉白仍然保留有大量健康胰腺。D组可见胰腺组织较正常组织相比形态结构消失,胰腺增厚,有大量钙化灶形成,结构不可见,脾脏肿大淤血。组织病理学切片:治疗第15天进行组织病理学观察观察,A组胰腺结构基本正常照胰腺组织无明显病理学改变,结构均匀;B组胰腺间质水肿、增宽,毛细血管充血、出血,可看到大量红细胞,胰腺小叶结构破坏,腺体固有结构消失,胞质空泡化,腺泡细胞萎缩,腺上皮细胞脱落、碎裂,大量炎症细胞浸润,大量空泡化形成损伤程度明显比对照组严重;C组,腺体结构清晰,胰腺组织轻度水肿,腺泡细胞灶性坏死,可见少量炎症细胞浸润及红细胞溢出。D组胰腺间质水肿、增宽,间质内同样可见少量红细胞,胞质空泡化,腺体固有结构消失,腺上皮细胞脱落,少量碎裂,程度较阳性对照组轻。结论:采用5%牛黄胆酸钠(0.1ml/kg)及重组胰蛋白酶(3500U/kg)混合液副胰管逆行注射的方法建立AP模型较稳定且成功率较高。BMSC-CM治疗效果优于乌司他丁组。