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心肌缺血再灌注是终止心肌坏死的方法之一,然而再灌注本身可能会加剧缺血后的心肌损伤。因此开发治疗心肌缺血再灌注损伤的药物具有重要意义。GX是由藏红花酸经结构修饰后得到的化合物,本论文通过在细胞水平和动物水平两个研究层面,观察GX对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能的作用机制。细胞水平上,首先利用药物诱导建立H9c2心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,通过细胞形态学观察缺氧/复氧模型是否建立成功;利用CCK-8法检测细胞存活率,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡以及荧光探针法检测细胞内ROS水平,观察GX对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。实验结果表明,10 μmol/L的GX可以明显提高细胞存活率、改善心肌细胞凋亡以及降低细胞内活性氧水平,说明GX在一定程度上可以改善由缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。动物水平上,建立在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型(缺血时间为30 min,再灌注120 min),设假手术组、模型组、阳性药红花黄色素组(20 mg/kg,i.v.)及GX高、中、低剂量组(9、6、3 mg/kg,i.v.);利用TTC染色法测定心肌梗死面积;小动物超声影像系统、PowerLab数据记录分析系统检测心功能;使用相应试剂盒测定大鼠血浆中CK、LDH、SOD、MDA、TNF-α、IL-11β、IL-6的含量或活性;利用实时荧光定量PCR方法检测未梗死左心室心肌组织中NOX2、NOX4及TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的变化。实验结果表明,与模型组比较,GX中、高剂量组可以明显减小心肌梗死面积,降低LVEDP,升高Max dp/dt、Min dp/dt及Heart-Rate等血流动力学参数,并同时显著升高EF、FS等心彩超评价指标;关键激酶结果显示,GX高剂量组可显著降低大鼠血浆中CK、LDH的活性,氧化应激指标结果显示,GX高剂量组可显著降低MDA水平并可以同时升高SOD活性,对血浆中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量也有明显的抑制作用;实时荧光定量PCR结果显示GX高剂量组可有效下调NOX2、NOX4及炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β的基因表达。综合以上结果,GX作为藏红花酸修饰物在细胞水平上,可以改善由缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤;动物水平上,可以显著减小缺血再灌注导致的心梗面积、改善心功能,从而起到对受损心肌的保护作用,其作用机制与抗氧自由基及降低心肌组织中炎症因子的表达相关。