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目的:近年来,免疫细胞化学和免疫磁珠富集技术已应用于检测乳腺癌患者循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)。本研究拟采用一种全新的改良免疫磁珠富集联合免疫荧光细胞化学技术(IME-FICC),检测转移性乳腺癌患者循环肿瘤细胞,探讨其临床应用的意义及循环肿瘤细胞数目是否可以早期预测转移性乳腺癌化疗疗效,即在化疗1周期后评价疗效,缩短判定时间50%。方法:放置人乳腺癌细胞(MCF-7)于正常人外周血标本中以检测本方法的敏感性。检测10例正常女性志愿者外周血标本,探索该方法的特异性。检测30例转移性乳腺癌患者化疗1周期前后CTC数目,同时应用WHO实体瘤近期疗效评价标准评价30例转移性乳腺癌患者化疗疗效。每份血样均分离其单个核细胞,通过与磁珠共价结合的上皮细胞粘附分子(EpiCAM)抗体富集外周血中表达EpiCAM抗原的肿瘤细胞,结合免疫荧光细胞化学法检测细胞角蛋白(CK)8/18阳性的肿瘤细胞(呈绿荧光)的数目,并用DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚)标记细胞核(呈蓝荧光)进一步排除假阳性。结果:IME-FICC敏感性较高,可在1×107的外周血单个核细胞中检测到1个肿瘤细胞。30例转移性乳腺癌患者的外周血中有21例检测到CK8/18阳性细胞,阳性率为70%,10例正常女性志愿者外周血中均未检测到CK8/18阳性细胞,特异性为100%,χ2=12.06,两组差异有统计学意义(P<0.05)。初步证明转移性乳腺癌患者不同腋窝淋巴结状态之间的循环肿瘤细胞阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。循环肿瘤细胞阳性率在原发肿瘤大小、绝经前后、不同病理类型、激素受体状况及HER2状况间差异无统计学意义(P均>0.05)。30例转移性乳腺癌患者化疗1周期后CTC数目上升13例,稳定8例,下降9例;WHO实体瘤近期疗效评价进展15例,无变化8例,缓解7例,χ2=0.125,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用IME-FICC方法检测乳腺癌患者循环肿瘤细胞,简单方便,耗时较少,敏感性、特异性高。该方法检测结果证明转移性乳腺癌患者循环肿瘤细胞与腋窝淋巴结状况密切相关。依据循环肿瘤细胞数目可能预测转移性乳腺癌化疗疗效,较目前常规的基于影像学结果判定疗效早3-4周即缩短50%。