蚕蛹蛋白质酶解制备蚕蛹活性肽的研究

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蚕蛹是家蚕繁育后代的母体,蕴藏着丰富的蛋白质、脂肪、磷脂、无机盐、维生素等生命营养成分,尤其是蛋白质含量极高,是一种优质的昆虫动物蛋白源,具有很高的营养和药用价值。蛋白质酶解是指蛋白质在酶的催化作用下水解生成肽、胨等低分子量产物的过程,活性肽是蛋白质结构中具有特殊生物活性的碎片序列,可利用动植物蛋白酶解得到。本论文以蚕蛹为研究对象,在通过对蚕蛹成分进行系统分析的基础上,研究酶促水解蚕蛹蛋白制备生物活性肽的规律,内容包括:采用实验法考察了不同缫丝厂干蚕蛹中水分、蛋白质、蛹油的含量;通过正交实验考察得到以石油醚来提取蚕蛹油的优化工艺条件:温度60℃,时间2h,料液比1:10;采用国标法测得脱脂蚕蛹粉主要成分:蛋白质68.86%、脂肪8.7%、水分4.63%、灰分3.12%;采用反向HPLC法测得蚕蛹蛋白质由18种氨基酸组成,8种人体必需氨基酸占总量的60%,氨基酸的配比、含量均符合FAO/WHO所规定的理想蛋白质模式;采用水解度为考察指标,筛选出适宜蚕蛹酶解的蛋白酶为碱性蛋白酶;采用单因素实验法考察得到蚕蛹蛋白质酶解最优工艺条件:底物浓度S0为6%~8%,酶用量Eo/S0为0.05%,pH值9.50,温度50℃,水解时间6.0h,此时蚕蛹酶解的水解度24.67%,蚕蛹酶解产物主要是小分子肽。根据实验数据和经验公式推出,50℃时碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白的水解度动力学模型:DH=4.5511n[1一(1.4663E0、S0+O.O164)t];水解速率动力学方程:r=(6.9725Eo+0.0781S0)exp[-0.2103(DH)];酶失活动力学模型:ab=1.4782Eo/S0+0.0156。动力学常数k2=6.9725min-1;,酶失活常数kd=1.4782min-1.经验证动力学模型与实验结果相吻合,说明该模型具有实际应用价值。
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