大鼠急性缺血性脑损伤后星形胶质细胞的活动及药物对其影响的研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanglin0824
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目的:探讨大鼠在急性缺血性脑损伤后脑中不同部位星形胶质细胞(astrocyte, AS)的活动情况,和施加药物后对该活动的影响。方法:采用线栓法实施大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)2h后进行再灌注,制成大鼠脑缺血再灌注模型。实验一,缺血再灌注模型大鼠分别给予不同剂量的甘露醇观察其再灌注后不同时间点的mNSS值。在缺血再灌注后72h免疫组化法测定各剂量组缺血周边及海马CA1区的胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性细胞数目。实验二,大鼠随机分为空白对照组、假手术组和缺血再灌注模型组,选用实验一中的最小有效剂量甘露醇,对该三组大鼠分别给予和不给予甘露醇,然后于再灌注后24h和72h时分别处死组内大鼠,观察缺血脑组织周边及海马CA1区GFAP阳性细胞数目的变化。其中缺血再灌注模型组的大鼠均切取一定部位的脑组织做TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色,观察甘露醇对模型组大鼠梗死病灶的作用。结果:实验一,0剂量组的神经功能缺损评分值(modified neurological severity score,mNSS)和小、中、大剂量组的差别均有统计学意义P=0.021,P=0.018,P=0.018,而小、中、大三个不同剂量组的mNSS值间的方差分析结果显示无统计学意义,P=0.996。小、中、大三个剂量组的不同再灌注时间点的mNSS值差异有统计学意义,均P=0.000;不同剂量组间缺血周边GFAP阳性细胞数目不完全相同,P=0.0020 Tukey HSD法多重比较结果为:0剂量组分别和小、中、大剂量组比较,P=0.009,P=0.005,P=0.003。而小、中、大剂量组间经Student-Newman-Keuls法和Tukey HSD法检验,P=0.899,P=0.971。不同剂量组间海马CA1区GFAP阳性细胞数目不完全相同,P=0.000。Tukey HSD法多重比较结果为:0剂量组分别和小、中、大剂量组比较,均P=0.000,而小、中、大剂量组间经Student-Newman-Keuls法和Tukey HSD法检验,P=0.748,P=0.883。大鼠缺血再灌注后72h的mNSS值和其对应的缺血周边的GFAP阳性细胞数目的Pearson相关系数为-0.528(P=0.008),表明两者间具有负相关性。同理缺血再灌注后72h的mNSS值和其对应的海马CA1区GFAP阳性细胞数目的Pearson相关系数为-0.720(P=0.000),表明两者间亦具有负相关性。实验二,模型组大鼠不用甘露醇和用甘露醇后对耳线8.2mm的冠状层面梗死面积的差别无统计学意义P=0.683,而再灌注后24h、72h的梗死面积差别亦无统计学意义P=0.773。手术程度、用甘露醇与否、再灌注后时间对缺血周边的GFAP阳性细胞数目的影响均有统计学意义,P=0.000,P=0.000,P=0.026,手术程度和用甘露醇与否之间存在交互效应,P=0.000,统计结果显示手术程度和用甘露醇与否存在协同作用。经Tukey(?)HSD检验,空白组和假手术组间、空白组和模型组间及假手术组和模型组间缺血周边GFAP阳性细胞数目差异均有统计学意义,均P=0.000。手术程度、用甘露醇与否、再灌注后时间对海马CA1区的GFAP阳性细胞数目的影响均有统计学意义,P=0.000,P=0.000,P=0.028,手术程度和用甘露醇与否存在交互效应,P=0.000,统计结果显示手术程度和用甘露醇与否存在协同作用。经Tukey HSD检验,空白组和假手术组间、空白组和模型组间及假手术组和模型组间差异均有统计学意义,均P=0.000。结论:本实验发现,一定程度上,尚不能认为不同剂量甘露醇对缺血再灌注大鼠模型缺血周边及海马CA1区AS的活动影响有区别。模型大鼠的mNSS值和缺血周边及海马CA1区的AS数目均有负相关性,即AS数目增多则mNSS值减少,神经功能表现越好。本实验证实了大鼠急性缺血性脑损伤后,缺血周边及海马CA1区AS反应性增生明显。使用甘露醇24h或72h后皆可明显增加缺血再灌注模型大鼠缺血周边及海马CA1区AS的反应性活动。由此可以推断急性缺血性脑损伤后应用甘露醇,可能通过增加缺血周边及海马CA1等区域的AS反应性活动来对缺血脑组织及周边组织起保护作用。
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