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目的:葡多酚(Grape procyanidins,GPC)是从葡萄中提取的天然植物多酚类活性物质。国内外研究报道具有抗氧化、抗自由基损伤、抗肿瘤等多种生物学功效。本研究以肝细胞和胸腺细胞为模型,采用小鼠口服给药和体外细胞培养两种方法,观察GPC对正常细胞和受损伤细胞增殖活性的影响作用。 方法: 1.肝脏 (1)取小鼠肝脏细胞体外培养,分别采用CCL4、乙醇和H2O2产生不同的活性氧自由基,造成肝细胞氧化损伤模型,用MTT方法和化学法,观察GPC对氧自由基引发的细胞氧化损伤和增殖活性抑制的影响作用,并同时检测GPC对正常肝细胞增殖活性的影响作用。 (2)小鼠经口给予GPC和大剂量乙醇(4g/kg),造成小鼠急性肝损伤,一周后处死动物,取肝脏,用MTT法检测细胞的增殖活性,并计算细胞增殖率。 2.胸腺 大鼠胸腺细胞体外培养条件下,加入H2O2和不同剂量的GPC,用流式细胞仪术分析GPC对H2O2引发的胸腺细胞凋亡及线粒体膜电位的影响作用。 结果:1.GPC可促进正常肝细胞的增殖活性,并呈现剂量效应关系。正常肝脏细胞体外培养36小时,50、100μg/mlGPC组细胞增殖活性为0.621±0.015和0.671±0.022,明显高于正常对照组(0.510±0.028)。 中文摘要 2.各种损伤因素作用的肝细胞增殖活性均较正常对照组下降,CPC保护组细胞增殖活性的损伤明显减轻。10mol/Lcc坑组细胞增殖活性为0.287士0.026,50协g/m 1 GPC组细胞增殖活性为0.405士0.016,两者差别具有显著性意义。loopl/m1乙醇组细胞增殖活性为O,365士0.024,50 pg/m 1 GPC组细胞增殖活性为0.541士0.026,明显高于阳性对照组。l1/lH八组细胞增殖活性为0.367士0.033,明显低于50协g/m 1 GPC保护组0.568士0.042。 3.体内试验中G代可明显减轻乙醇引发的小鼠急性肝损伤的程度。阳性对照组小鼠肝细胞增殖率为0.064士0.022,巧omg/m IGPC保护组细胞增殖率0.119士0.015,两者差别有显著性意义。 4.流式细胞术测定结果显示,阳性对照组胸腺细胞凋亡率为29.5器,线粒体膜电位为27.24,50协g/m 1 GPC保护组细胞凋亡率较阳性对照组降低22.0器,线粒体膜电位升高60,31。 结论:G代可降低活性氧自由基造成的肝脏细胞和脚腺细胞增殖活性的抑制,减少了脂质过氧化物的产生,提高了抗氧化酶的活性,表明GPC对自由基引发的细胞氧化损伤有良好的防护作用。而且GPC对正常肝细胞的增殖活性也有明显的促进作用。