扩张力作用下大鼠顶骨矢状缝成骨活动的定量分析

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目的: 通过显微图像分析系统测量骨缝组织中骨—骨缝边缘长、骨缝组织面积、骨缝组织面积积分光密度和骨缝组织平均光密度,并计算骨缝组织中成骨细胞AKP染色阳性表达率,结合骨缝组织H.E.染色形态学观察,对扩张力作用下骨缝改建过程中成骨活动进行定量分析。 方法: 选用鼠龄7周左右的健康雄性SD大鼠72只,随机分到正常对照组、手术对照组、实验加力组,分别在实验第4天、第7天和第14天时各处死8只。取材制片后,采用免疫组化SP法进行内源性骨形成蛋白免疫组织化学染色,通过显微图像分析系统测量骨-骨缝边缘长、骨缝组织面积、骨缝组织的面积积分光密度和骨缝组织的平均光密度;采用酶组织化学偶氮色素法进行碱性磷酸酶染色,通过计数阳性反应细胞数,计算成骨细胞阳性表达率;同时采用常规H.E.染色,观察骨缝组织光镜下的形态学改变。 结果: (1)实验加力组在100g扩张力作用下,第4天组和第7天组实验动物的骨缝组织面积显著增加。 (2)加力后第7天,实验加力组动物的骨缝组织中骨—骨缝边缘长、面积积分光密度、平均光密度和成骨细胞AKP阳性表达率最高。 (3)加力后第14天,实验加力组动物的骨缝组织中骨—骨缝边缘长较加力后第7天组没有显著性差异。 结论: (1)100g扩张力作用下,持续到加力后第7天骨缝纤维组织保持活跃增殖。 (2)第7天时骨缝组织中BMPs含量和AKP活性最高,成骨活动最活跃。 (3)第14天时沿着骨缝边缘的骨沉积和骨基质矿化持续活跃进行。 (4)利用TIGER图像分析仪能够对骨缝改建中成骨活跃程度进行定位和定量分析。
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