双斑侧沟茧蜂病毒(Microplitisbicoloratus bracovirus,MbBV)是寄生蜂 Microplitis bicoloratus的共生病毒。前期的研究已经表明MbBV能够抑制细胞转录水平可能与调控NF-κB有关,但对MbBV与NF-κB信号通路及其相互作用蛋白Cactus和Dip3的研究尚少。研究已经发现,MbBV的基因组中含有大量的IκB-like基因,预测这些基因编码的蛋白含有Ank-repeat结构域,被统一命名为Viral ankyrin protein(Vank),病毒Vanks的结构和NF-κB信号通路中的抑制蛋白IκB蛋白Cactus结构相似。Dorsal-interacting protein 3(Dip3)是与NF-κB蛋白相互作用的蛋白。本论文就MbBV对NF-κB及其相互作用蛋白Cactus和Dip3进行研究,通过MbBV病毒感染不同的3种鳞翅目昆虫细胞系斜纹夜蛾细胞系Spli221、草地贪夜蛾细胞系Sf9、粉纹夜蛾细胞系High Five后,检测NF-κB下游抗菌肽基因attacin、defensin的变化;通过检测病毒IκB-like蛋白、Cactus蛋白和Dip3蛋白的关系,检测NF-κB下游基因Innexins的变化;进一步沉默Cactus和Dip3后检测对寄主细胞凋亡的影响,从中得到以下研究结果:1、MbBV调控了 NF-κB下游抗菌肽基因attacin、defensin的mRNA的转录,其中,attacin基因显著下调。MbBV基因片段能够插入到Spli221、Sf9、HighFive中,在感染细胞的基因组中能检测到vank86、vank92基因片段,而且转录模式不同。在Spli221细胞过表达vank86、vank92并不能明显抑制由LPS刺激后attacin、defensin的mRNA表达水平。2、MbBV 病毒IκB-like 蛋白 Vank86、Vank92、Vank101与 Dip3 形成异源二聚体。瞬时共转发现 Vank86-Dip3、Vank92-Dip3,Vank101-Dip3 异源二聚体,推测是 BESS domain与Ank-repeat发生了相互作用。研究发现Cactus并不能与Dip3相互作用,推测可能与蛋白修饰化位点有关。同时发现Cactus蛋白分布在细胞质与细胞核中,MbBV病毒抑制Cactus蛋白和Dip3蛋白的蛋白表达。感染MbBV病毒的细胞中,过量表达Dip3,能够抑制NF-κB调控的下游基因Innexins的转录。3、在寄生蜂幼虫活体条件下,dsRNAfeeding发现,RNAi沉默Cactus和Dip3诱导寄主的血细胞发生凋亡,但单个沉默不能抑制寄主的头壳发育。以上实验结果为进一步深入研究MbBV病毒调控免疫信号通路的机制以及将来寻找生物靶基因奠定了一定的基础。