知母治疗甲亢有效成分筛选及体内代谢研究

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甲状腺功能亢进症(hyperthyroidism,简称甲亢),是由多种原因导致的甲状腺功能亢进和(或)血循环中甲状腺激素水平增高所导致的一种常见内分泌疾病。其临床上以高代谢征群、甲状腺肿大、突眼症、神经及心血管系统功能紊乱为特征,病理上甲状腺可呈弥漫性、结节性或混合性肿大等表现。知母为百合科植物知母的根茎,味甘、苦,性寒,入肺、胃、肾经,具有清热泻火、生津润燥、滋阴降火、润燥滑肠之功效。本文先对药材知母进行提取分离,实验将药材知母通过大孔树脂、制备液相等方法制备出知母中主要的化学成分,为后续药理活性筛选做准备。并且通过液质联用技术对知母水提液进行定性分析,共检测出19个化学成分,其中皂苷类成分16个,(?)酮类成分3个。利用左旋甲状腺素钠诱导的甲亢动物模型,通过动物体重、饮水、摄食、心脏重量及血清指标评价样品治疗甲亢效果,筛选出药材知母中治疗甲亢有效成分。知母的三种提取物中,知母总皂苷可降低甲亢小鼠的体重、摄食、饮水以及心脏肥大等四项指标(P<0.05/0.01),知母水提液可显著降低甲亢小鼠的体重和心脏肥大等两项指标(P<0.05),知母(?)酮可显著降低甲亢小鼠的体重和心脏肥大等两项指标(P<0.05)。综上所述,知母总皂苷是知母中治疗甲亢的有效部位。因此,对知母总皂苷中治疗甲亢的有效成分进行研究。知母皂苷BⅢ可降低甲亢小鼠的体重、摄食及心脏肥大等三项指标(P<0.05/0.01),知母皂苷BⅡ可显著降低甲亢小鼠的体重、摄食、饮水、心脏肥大以及血清游离T4含量等五项指标(P<0.05/0.01)。通过以上数据确定知母皂苷BⅡ具有甲亢治疗作用。最后比较分析活性成分在正常动物与模型动物体内代谢的比较。利用HPLC-QTOF-MS/MS技术,共检测和鉴定出原型成分和及其16个代谢产物,并发现知母皂苷BⅡ在生物体内主要经历Ⅰ相代谢反应(即脱水、去糖基化、羟基化等)。在未造模组含药血浆中检测到原型和10个代谢产物;在尿中检测到原型和15个代谢产物;在粪中检测到原型和10个代谢产物;在心、肝、脾、肾和甲状腺肿检测到原型和1个代谢产物;在肺中未检测到原型成分,检测到一个代谢产物)。在造膜组含药血浆中检测到原型和8个代谢产物;在尿中检测到原型脱水和12个代谢产物;在粪中检测到原型和11个代谢产物;在心、肝、肾、甲状腺中检测到原型和1个代谢产物在脾和肺中检测到了原型成分。综上所述,知母中治疗甲亢有效成分为知母皂苷BⅡ。口服给药后,知母皂苷BⅡ在正常动物与模型动物体内代谢产物种类上没有明显差异,但在组织分布上略有不同。
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