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前言 恶性肿瘤的生长、转移有很多机制参与。一般认为，由细胞表面粘附分子所介导的细胞与细胞外基质的相互作用是肿瘤生长、侵袭、转移的生物学基础。随着分子生物学、肿瘤遗传学的研究进展，人们已逐渐认识到，分化群第44号(Cluster of Differentiation44，CD44)作为细胞表面粘附分子在其中起着重要作用。 CD44是跨膜糖蛋白，基因至少由20个外显子和其间的内含子组成。视拼接外显子是否参与组成而分为标准型CD44(Standard CD44，CD44s)与变异型CD44(Variant CD44，CD44v)。CD44s在正常组织中分布广泛，而CD44v分布局限。CD44功能包括：细胞粘附、淋巴细胞归巢与激活、骨髓细胞生成、血管生成等。肿瘤细胞表达不同形式的CD44v，并具有组织特异性。CD44参与肿瘤生长、侵袭、转移主要在于可改变细胞粘附，对细胞的运动及有丝分裂发出信号、能诱导细胞产生自泌性生长因子、吸收降解透明质酸使细胞分离及与其他癌基因如Ras协同作用等。有关CD44与肿瘤的相关性已在较多肿瘤及细胞系中得到证实。但CD44与正常骨及骨肿瘤之间的关系研究得较少。有关CD44v6在不同生物学行为的骨肿瘤中的表达变化则更少有报道。 实验材料 所有标本取自中国医科大学第一临床学院病理科(1992～2001)。标本经福尔马林固定，常规石蜡切片，厚5μm，经HE染色组织学观察确定。其中骨肉瘤26例，骨巨细胞瘤34例(按Jaffe分级Ⅰ级15例，Ⅱ级15例，Ⅲ级4例)，对照组骨软骨瘤23例。免疫组化试剂CD44v6单克隆抗体为福建迈新公司产品。 实验方法 本实验采用S－P免疫组织化学方法对26例骨肉瘤、34例骨巨细胞瘤的CD44v6蛋白进行检测。并与23例骨软骨瘤标本进行对照。CD44v6表达以细胞膜出现棕黄色染色为阳性，随机记数10个高倍视野，取平均值综合评定。按阳性细胞所占比例记录如下：无阳性细胞为阴性（刁，阳性细胞数＜25％为弱阳性（＋L阳性细胞数在25％－50％之间为中度阳性（＋十片阳性细胞数＞50％为强阳性（＋＋十人用 X‘检验和确切概率法进行统计学分析。 实验结果 CD44v6在本组骨肉瘤中的表达阳性率为53．85％，在骨巨细胞瘤中为26．47％，而骨软骨瘤中的CD44v6表达阳性率为0．00％。骨肉瘤的CD44v6表达与骨软骨瘤相比有显著性差异；骨巨细胞瘤与骨软骨瘤的CD44v6表达相比也有显著性差异；CD44v6在骨肉瘤和骨巨细胞瘤中的表达也有显著差异。在骨巨细胞瘤中，I级与11一皿级的 CD44v6表达比较有显著性差异。 讨 论 CD44是跨膜糖蛋白，在人类其基因定位于染色体liP，基因长度50Kb，至少由20个外显子和其间的内含子组成，外显子分为组成型外显子和拼接外显子。CD44分子分为CD44S及CD44V两种。CD44S仅含组成型外显子，分布广泛。CD44V含有组成型外 ·二· 显子及拼接外显子。CD44V拼接外显子的选择性拼接发生于转录 阶段，受严格控制，目前已证实的有10余种CD44V，在正常组织中 分布局限。 CD44y与肿瘤的相关性于1991年由德国研究人员确认。 CD44通过其介导的细胞粘附、有丝分裂调控、协同癌基因作用、参 与血管生成等作用，对肿瘤细胞发展、侵袭、转移有重要作用。研 究发现，肿瘤细胞表达多种形式的CD44y，并且其表达具有组织特 异性。CD44v6作为 CD44y的一种，在其中尤为重要。很多研究 发现，CD44v6在结肠癌中与P53、K－ras基因协同一致作用，并且 其表达可能先于 P53和 K－rs的表达。非小细胞肺癌、卵巢癌。 子宫内膜癌中的CD44v6表达均与肿瘤的发展、局部侵袭及淋巴 和血行转移有密切关系。在软组织肉瘤中CD44v6的高表达与局 部复发呈正相关，并与病人预后相关心因CD44产物可溶于血中， 近来研究人员已逐渐开始进行血清中可溶性CD44水平与各种肿 瘤相关性的研究。 有关骨及骨肿瘤中CD44表达的研究发现人D44在成骨细胞 分化的各阶段均有表达，骨肉瘤细胞系MG－63也有CD44的表 达，但所表达CD44分子的形式不同。表达的变化使细胞粘附发 生改变，使CD44有可能在骨肿瘤的发生发展中起作用。考虑 CD44参与骨肿瘤发生发展的可能机制为：变异表达的CD44使细 胞粘附发生改变；同时人D44与Ras癌基因协同作用，促进肿瘤形 成人D44还诱导肿瘤细胞产生自泌性生长因子，并能诱导细胞产 生血管形成因子，有参与肿瘤血管生成，促进肿瘤发展的作用。据 研究人＊的这些肿瘤形成作用主要为CD44v6所致。实验中观 察到 CD44v6的细胞浆染色，根据有关研究，此情况表明透明质酸 的吸收。这种染色在肿瘤边缘较重，这同设想的CD44的肿瘤侵 袭作用相吻合。 本实验将最常见的恶性骨肿瘤一骨肉瘤及介于良恶性之间的 ·二了·溶骨性肿瘤一骨巨细胞瘤作为研究对象，并以骨软骨瘤作为对照，研究CMv6在骨肿瘤中的表达情况，探讨CD44v6在骨肿瘤