本研究在6个环节对山羊—牛异种细胞核移植进行了研究：1 作为供核体山羊耳部细胞体外培养；2 山羊、牛卵母细胞的体外成熟培养；3 Spindle view在家畜卵母细胞去核中的应用；4 不同供核细胞和注核方法对克隆效率的影响；5 同种与异种克隆胚胎体外发育能力的研究；6 克隆胚胎移植的研究。供核山羊体细胞的分离培养。分别对成年雄性布尔山羊、6月龄雄性布尔山羊、成年雌性麻山羊、6月龄雌性布尔山羊的耳组织采样并进行细胞的分离培养。通过耳组织块的贴附培养可以实现山羊体细胞的原代培养。研究表明幼年山羊耳组织分离细胞的成功率在60%左右；而成年山羊耳组织分离细胞的成功率在40%左右。成年山羊的皮肤细胞传至5代以后，容易出现生长不良现象，添加尿嘧啶和丙酮酸钠可以明显改善细胞的生长状况；采用以下几种培养液对牛卵母细胞进行体外成熟培养，①TCM-199液内添加0.22 mg/mL丙酮酸钠，10 mM Hepes，0.10IU HMG/mL，1 mg/mL17?-E2，10%胎牛血清; ②SOF液内添加0.10IU HMG/mL，1 mg/mL17?-E2，6 mg/mL BSA; ③CR1液内添加0.10IU HMG/mL，1 mg/mL17?-E2，6 mg/mL BSA; ④培养液①内添加转铁蛋白、EGF; ⑤培养液①内添加转铁蛋白(ITS)、EGF、尿嘧啶。培养22小时第一极体可见率分别为①62.5%(303/485),② 52.5%(156/297),③63.8%(192/301),④63.6%(930/1462),⑤67.9%(292/430)。其中第②组明显低于其他4组（0.01<P<0.05），其他4组间没有显著性差异(P>.05)；利用上述①④⑤培养液对山羊卵母细胞进行体外成熟培养，培养22小时第一极体可见率分别为①39.8%(209/525),④71.8%(1129/1572),⑤67.9%(285/420)。①组与其他2组差异极显著(P<0.01)，其他2组间没有显著差异(P>.05)。用Spindle-view对牛、羊、猪、小鼠和家兔等几种动物的卵母细胞去核进行了研究。结果表明，①成熟培养20-26小时牛成熟卵母细胞Spindle-view观察减数分裂纺缍体与极体位置变化不明显；②根据纺锤体是否可见和纺锤体是否清晰可以对卵母细胞质量进行评定；③Spindle-view除牛外可用于家兔、小鼠、山羊卵母细胞减数分裂纺缍体的观察。来源于不同年龄（成年 vs. 6月龄）的供体细胞与去核卵母细胞构建核移植胚胎，两者间重构胚胎融合率和卵裂率没有明显差异（44.5%,72.0% vs. 48.8%,65.4%）；同一供体不同代数细胞（5代以前 vs. 5代以后）与去核卵母细胞构建核移植胚胎，两者间重构胚融合率、卵裂率和囊胚发育率分别为61.1%,60.6%,35.0% vs. 38.7%,78.3%,23.4%,其中融合率差异极显著(P<0.01)，但卵裂率和囊胚发育率没有显著差异(P>.05)。融合法与细胞质内注射法相比，两者间重构胚完整率和囊胚发育率（44.5%,19.4% vs. 54.5%,16.4%）没有显著差异(P>0.05)。 <WP=8>以山羊体细胞分别与山羊去核卵母细胞和牛去核卵母细胞构建核移植胚胎，两者胚胎分裂率和桑囊胚发育率分别为85.8%,69.1% vs. 77.2%,4.5%。其中卵裂率之间没有显著差异(P>0.05)，但桑囊胚发育率之间差异极显著(P<0.01)。将28枚囊胚和35枚桑椹胚移植到7只受体羊体内，结果有1只受体羊于移植后74天返情；将311枚2-4细胞期胚胎移植给19只受体羊，有5只受体羊移植超过40天后返情，另有两只羊一直没有返情，手术剖检，确认胎儿早期妊娠死亡。结 论：由山羊耳部可以分离培养皮肤细胞以用于克隆研究；卵母细胞成熟时添加尿嘧啶等物质不能明显提高牛卵母细胞第一极体可见率，但明显改善卵母细胞的可操作性；添加尿嘧啶等物质能明显提高山羊卵母细胞第一极体可见率。Spindle-view可用于对牛、山羊动物卵母细胞进行去核操作，效果确凿；不同年龄来源的供体细胞对克隆胚胎融合率和卵裂率没有影响；同一个体不同代数细胞对克隆胚胎的融合率有极显著影响，对分裂率和囊胚发育率没有影响；山羊-山羊种内与山羊-牛种间克隆相比，两者融合率和卵裂率没有显著差异，但是桑囊胚发育率之间差异极显著。移植克隆胚的胚龄与受体羊的妊娠率有一定关系。