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甾体药物广泛应用于医药领域,已成为仅次于抗生素的第二大类药物,大量的需求推进了它的发展,专一性强、安全、高效的微生物转化法逐渐成为甾体药物的研究热点。雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)是制备甾体激素类药物的重要中间体,经11α-羟基化得到C11α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮(C11α-OH-AD),是制备用于治疗高血压及充血性心力衰竭的新型药物——依普利酮的关键中间体。本论文主要运用微生物转化法,对底物雄甾-4-烯-3,17-二酮进行11a-羟基化反应,合成产物Clla-羟基雄甾-4-烯-3,17-二二酮,通过实验研究筛选出了可进行转化反应的微生物出发菌种,确定了产物转化及分析方法、发酵培养基组成以及转化工艺。本论文首先确定了高效液相色谱检测条件,采用C18烷基硅烷键合反相柱、流动相为甲醇：水=3：2(v/v)、流速0.8mL/min、色谱柱温25℃、紫外检测器波长242nm,并确定了转化方法为一步转化法以及制备检测样品的萃取剂为甲醇。其次,在4株RN菌种中挑选出转化率较高的RN-M24菌种作为出发菌种进行分离筛选,筛选出菌株RN-M246进行培养基优化,优化结果(g/L)为葡萄糖30、蛋白胨20、冷豆粉12、柠檬酸三铵1、磷酸氢二铵5、氯化钠1、硫酸亚铁0.5,pH5.0。转化率达40.72%。最后,优化了在转化工艺方面,研究了底物的添加、发酵时间、接种量、装液量、温度转速以及添加物质的影响。结果表明,装液量为每500mL摇瓶装75mL发酵培养基,底物以2g/L的浓度添加,灭菌后超声10min进行接种,接种量4%,在28℃下反应72h,前24h内转速为160r/min,24h后则调整为220r/min,转化率为46.87%。另外,研究中发现,在培养基中添加100g/L的玉米油对转化率有显著的提高,可达52.87%。此外,本文还初步研究讨论了MA菌种对雄甾-4-烯-3,17-二酮的转化情况。活化并筛选MA菌种得到MA-18,确定发酵培养基(g/L)为葡萄糖30、蚕蛹粉5、硫酸铵2.5、玉米浆20、磷酸氢二钾1、硫酸镁0.5、硫酸亚铁0.02,pH6.0。并通过底物添加的考察确定最优添加时间为反应最初时添加。转化率可达44%。