胚胎着床是成功妊娠的起始和重要环节，人类胚胎着床通常发生在排卵后的6-8天，这一时期称为围着床期或着床窗，此乃妊娠发生与启动最重要的限速步骤。血管生成是指新生毛细血管从已经存在的血管中发生和发育的整个过程，是组织再生的重要特征和必要前提，其具体步骤包括:血管内皮细胞迁移至原始血管基层裂解后形成的区域、增殖形成毛细血管芽、生长及重建形成新动脉或静脉。　　第一章:PGE2影响NR8383巨噬细胞株VEGF mRNA的表达　　目的:　　为了探讨在围着床期女性生殖系统发挥正常功能中起到关键作用的PGE2是否是调控女性生殖系统局部巨噬细胞的信号分子，我们选取大鼠巨噬细胞株NR8383进行体外细胞学实验，通过采用0、0.1nmol/L PGE2、1nmol/LPGE2分别处理大鼠NR8383巨噬细胞株，通过检测大鼠NR8383巨噬细胞内VEGFmRNA的表达水平，来验证PGE2可以影响NR8383巨噬细胞合成分泌VEGF的能力。　　方法:　　取处于对数生长期的大鼠NR8383巨噬细胞株，分别采用0nmol/LPGE2，0.1nmol/L PGE2，1nmol/LPGE2处理5天。将处理后的大鼠NR8383巨噬细胞放置在在37℃，5％C02的细胞培养箱中培养。　　结果:　　1.PGE2可以促进大鼠NR8383巨噬细胞内VEGF mRNA的表达　　与未采用PGE2处理的NR8383大鼠巨噬细胞内VEGF mRNA的表达水平相比，经PGE2处理后的NR8383细胞内VEGF mRNA的表达水平明显升高。　　2.PGE2促进大鼠NR8383巨噬细胞表达VEGF mRNA的能力随着PGE2的浓度升高而升高。　　结论:　　实验结果显示，PGE2处理后的大鼠NR8383巨噬细胞其细胞内VEGFmRNA的表达显著升高。并且，进一步研究发现，PGE2对大鼠NR8383巨噬细胞内VEGF mRNA表达的促进作用与PGE2的作用浓度成正比，随着PGE2处理浓度的升高，大鼠NR8383巨噬细胞内VEGF mRNA的表达水平也随之升高。因此，实验结果提示PGE2可以增强大鼠NR8383巨噬细胞合成分泌VEGF，从而增强其促进血管生成的能力。　　第二章:PGE2影响NR8383细胞株促进HUVEC细胞迁移的能力　　目的:　　采用体外细胞学实验-Transwell小室细胞迁移实验，取不同浓度PGE2处理下的NR8383大鼠巨噬细胞的细胞培养上清液来处理HUVECs，观察HUVECs迁移的数目，验证PGE2是否可以增强大鼠NR8383巨噬细胞促进人脐静脉血管内皮细胞迁移的能力，进一步论证PGE2可以增强大鼠NR8383巨噬细胞促进血管生成的作用。　　方法:　　选择处于对数生长期的大鼠NR8383巨噬细胞，以含10％胎牛血清的RPMI-1640培养液重悬细胞，调整细胞密度为1×105/mL，分别用0、0.1nmol/LPGE2、1nmol/L PGE2去处理大鼠NR8383巨噬细胞，处理5天。　　结果:　　1.PGE2处理后增强大鼠NR8383巨噬细胞促进HUVECs迁移的能力。　　2.PGE2增强大鼠NR8383巨噬细胞促进HUVEC迁移的能力与PGE2作用浓度呈正相关性。　　结论:　　Transwell小室细胞迁移实验结果显示，经PGE2处理过后的大鼠NR8383巨噬细胞其促进HUVECs迁移的能力明显增强，并且其促进HUVECs迁移的能力随着PGE2处理浓度的升高而升高。研究结果提示，PGE2可以增强大鼠NR8383巨噬细胞促进血管内皮细胞趋化募集的能力，而新生血管内皮细胞的募集趋化是血管生成过程中的重要步骤，因此进一步提示，PGE2可以增强大鼠NR8383巨噬细胞促进血管生成的能力。　　第三章:PGE2影响NR8383细胞株促进HUVEC细胞成管的能力　　目的:　　采用Matrigel基质胶细胞成管实验，通过不同PGE2浓度处理NR8383大鼠巨噬细胞，取不同处理下的细胞培养上清液来处理HUVECs，观察HUVECs成管的面积。从而进一步验证PGE2对NR8383大鼠巨噬细胞促进血管生成的调控作用。　　方法:　　在实验前预先将Tip头、培养板等所有实验中会接触Matrigel基质胶的物品放置在-20℃冰箱进行预冷。然后，把Matrigel基质胶置于2-8℃冰箱中过夜融化。当基质胶呈现液态状后，向96孔培养板中每孔加入60μL，置于37℃1h以成胶。　　结果:　　1.PGE2可以增强NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs成管的能力。　　2.PGE2增强NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs成管的能力随着PGE2处理浓度的提高而提高。　　结论:　　Matrigel基质胶细胞成管实验结果提示，PGE2处理后的NR8383大鼠巨噬细胞的细胞培养上清液可以显著促进HUVECs成管，其成管面积显著增加;并且PGE2增强NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs成管的能力随着PGE2处理浓度的升高而升高。结果进一步证实，PGE2可能通过影响血管内皮细胞形成管状结构这个过程，来增强NR8383大鼠巨噬细胞促进血管生成的能力。提示PGE2是巨噬细胞促进血管新生过程中的一个重要调控因子。值得我们进一步探索其具体的分子信号机制。　　第四章:PGE2特异性受体拮抗剂抑制PGE2对NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVEC细胞促进血管生成的调控作用　　目的:　　选择了PGE2 EP2受体特异性拮抗剂---AH6809和PGE2 EP4受体特异性拮抗剂---AH23848来处理NR8383大鼠巨噬细胞，通过观察NR8383大鼠巨噬细胞内VEGF mRNA表达水平的变化以及处理后NR8383大鼠巨噬细胞的细胞培养上清液对HUVECs迁移和成管作用的影响，来进一步证实，PGE2是通过作用于NR8383大鼠巨噬细胞表面的特异性受体，从而增强NR8383大鼠巨噬细胞促进血管生成的作用。　　方法:　　取对数生长期的NR8383大鼠巨噬细胞，以1nmol/LPGE2处理的NR8383大鼠巨噬细胞为对照组，以1nmol/LPGE2+10nmol/LPGE2 EP2受体拮抗剂AH6809+10nmol/LPGE2 EP4受体拮抗剂AH23848处理的NR8383大鼠巨噬细胞作为实验组。培养5天后，分别进行荧光定量PCR实验检测NR8383大鼠巨噬细胞内VEGF mRNA的表达水平;采用Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel基质胶细胞成管实验来检测NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs趋化和成管的能力。具体实验方法均如上文所述。　　结果:　　1.PGE2特异性受体拮抗剂可以抑制PGE2增强NR8383大鼠巨噬细胞内VEGF mRNA表达的作用。　　研究发现，与未采用AH6809和AH23848处理的对照组相比，AH6809和AH23848处理组NR8383大鼠巨噬细胞内VEGF mRNA的表达水平发生显著降低(P＜0.05)。提示AH6809和AH23848处理可以显著抑制PGE2对NR8383大鼠巨噬细胞内VEGF mRNA表达的促进作用。　　2.PGE2特异性受体拮抗剂可以抑制PGE2增强NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs迁移的能力。　　研究发现，与未采用AH6809和AH23848处理的对照组相比，AH6809和AH23848处理组HUVECs发生跨膜迁移的细胞数显著减少(P＜0.000)。提示PGE2处理可以显著抑制PGE2对NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs趋化迁移能力的增强作用。　　3.PGE2特异性受体拮抗剂可以抑制PGE2增强NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs成管的能力。　　研究发现，与未采用AH6809和AH23848处理的对照组相比，AH6809和AH23848处理组HUVECs形成管状结构的面积显著减少(P＜0.000)。提示PGE2处理可以显著抑制PGE2对NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs成管能力的增强作用。　　结论:　　实验结果表明，当应用PGE2特异性受体拮抗剂处理NR8383大鼠巨噬细胞后，可以显著抑制PGE2提高NR8383大鼠巨噬细胞内VEGF mRNA表达的效应，也可以显著拮抗PGE2增强NR8383大鼠巨噬细胞促进HUVECs迁移和成管的能力，抑制PGE2促进NR8383大鼠巨噬细胞促进血管新生的效应。因此研究结果证实，PGE2与NR8383大鼠巨噬细胞存在相互作用，PGE2是通过直接作用于NR8383大鼠巨噬细胞表面对应的受体，来增强NR8383大鼠巨噬细胞促进血管生成的效应。进一步提示，PGE2是调控巨噬细胞促进血管新生的重要活性分子，为后续进一步探究围着床期女性生殖系统中PGE2是否是参与女性生殖系统局部巨噬细胞促进血管新生活动的重要调控因子提供了理论依据。