精子从发生、成熟必须经历睾丸和附睾等器官，其本身也从形态成熟过渡到功能成熟，从而具备受精的能力。在这一过程中，精子通过与雄性生殖系统各器官和附属腺的分泌成份相互作用，在形态结构、生化代谢和生理功能等方面都发生巨大变化，尤其是精子膜成份的改变，为精子获能、顶体反应及精卵融合提供了必要的条件。 本课题组在对人精浆中与精子运动相关蛋白的研究中，曾发现人锌－a2糖蛋白（ZAG）与精子的功能成熟相关。前期研究结果表明：人精浆中的ZAG可与a1抗胰蛋白酶(AAT)相结合，进而激活附睾头部不能运动的精子向前运动。进一步研究表明，ZAG的作用机制主要是通过激活精子内部cAMP/PKA信号通路来调节精子的活动力。 然而，精浆中ZAG的来源及其在精子成熟和受精中的功能尚不明确。因此，在本课题研究中，以SD大鼠为动物模型，运用实时荧光定量PCR、免疫印迹和间接免疫荧光等检测技术，首次确认了ZAG蛋白在雄性生殖系统中的表达情况，结果显示：ZAG主要在附睾表达，且附睾尾部上皮表达最高。因此，分离、培养了大鼠的附睾尾部上皮细胞，构建了四个针对ZAG不同靶序列的shRNA表达载体，将各个shRNA表达载体分别转染至附睾尾部上皮的培养细胞以干扰ZAG的基因表达，结果表明其中两个shRNA表达载体干扰效果明显，ZAG在mRNA和蛋白质水平的表达均有降低，这为我们进一步的体内RNA干扰实验奠定了必要的基础。