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目的评估MRI导向立体定向活检技术在儿童弥漫型内生性脑桥胶质瘤(Diffuse Intrinsic Pontine Gliomas,DIPG)应用中的安全性、有效性,探讨立体定向活检技术在DIPG诊断中的临床价值。方法回顾性分析2014年1月~2018年12月于中国人民解放军总医院第六医学中心行立体定向儿童脑干病变活检手术病例,采取MRI导向立体定向活检术取材。按纳入标准和排除标准共66例患儿纳入研究,男性30例,女性36例,年龄分布2~17岁,中位年龄7.5岁。采集患儿的一般资料、影像学特点、活检方式、组织病理或分子病理等信息。应用χ2检验或Fishers精确检验和Mann-Whitney U检验对可能影响活检诊断率及并发症发生率的因素进行单因素分析,进一步采用多变量Logistic回归对诊断率及并发症发生率的影响因素进行多因素分析。结果共66例患儿纳入研究,明确诊断62例,未明确诊断4例,活检阳性率93.9%,间变型星形细胞瘤(WHOⅢ级)27例,弥漫型星形细胞瘤(WHOⅡ级)23例,胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)7例,间变型少突星形细胞瘤(WHOⅢ级)2例,毛细胞星型细胞瘤(WHOⅠ级)1例,原始神经外胚层肿瘤(Primitive Neuroectodermal Tumor,PNET)1例,神经节细胞瘤(WHOⅠ级)1例。术后出现并发症9例,并发症发生率13.6%,术后CT显示活检出血3例,症状性出血2例,无症状性出血1例,出血率4.5%,无手术相关死亡病例。单因素分析显示性别(p=0.742),年龄(p=0.725),病变是否强化(p=0.816),活检方式(p=0.563)对诊断率的影响无统计学差异,而穿刺途径(p=0.026),病史时间(p=0.035)对诊断率的影响有统计学差异。性别(p=0.252),年龄(p=0.955),病史时间(p=0.572),病变是否强化(p=0.085),活检方式(p=1.000),穿刺途径(p=0.134)对并发症发生率的影响均无统计学差异。多变量Logistic回归分析显示症状持续时间(p=0.166)不是影响诊断率的主要危险因素,穿刺途径是影响诊断率的主要危险因素(p=0.034,OR=17.868),枕下小脑途径可能提供更高的诊断率。结论基于影像学特征对儿童DIPG进行经验性放疗和化疗的传统诊疗方案具有很大的局限性,立体定向活检术在儿童DIPG中应用安全、可靠,具有较高诊断率,能有效指导后续治疗方案的制定。活检方式不是影响诊断率及并发症发生率的危险因素,框架活检和无框架机器人辅助活检均能安全有效的对儿童脑干肿瘤实施活检,活检穿刺途径是影响诊断率的主要危险因素,经枕小脑穿刺活检可能提供更高的诊断率。通过立体定向活检明确组织病理和分子生物学信息可为儿童脑干胶质瘤的个体化治疗和分子靶向治疗提供理论基础。