独一味止血作用及机制的研究及其活性部位的提取分离

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目的: 藏药独一味(Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo)作为一种传统的镇痛、止血药,已经使用多年,经过临床验证是确实有效的,本文将对其止血作用及机制进行研究,从中筛选出止血有效部位,并比较独一味水提取物(HLRE)和止血有效部位的毒性。结合植物化学方法,研究大孔吸附树脂提取分离独一味止血有效部位的工艺,并建立相应的检测质控标准(QC)。为将其开发为一种止血新药提供理论依据。 方法: (1)观察独一味水提取物及其各有效部位灌胃给药后对小鼠CT、BT的影响,测定独一味水提取物和总环烯醚萜苷不同给药剂量和不同给药时间后对大鼠血液凝集参数、生化指标、血液学指标的影响。(2)观察独一味水提取物和总环烯醚萜苷小鼠一次性灌胃或腹腔给药后的急性毒性效应。(3)用一阶导数紫外分光光度法进行独一味总环烯醚萜苷的含量测定,为独一味植化分离出的有效部位的含量检测提供依据。(4)采用三因素、三水平的正交实验研究独一味水提取物的提取工艺;应用聚酰胺—大孔吸附树脂分离独一味各部位,优化大孔吸附树脂富集分离独一味止血活性部位总环烯醚萜苷的制备工艺。 结果: (1)独一味水提取物(HLRE)灌胃给药后能显著缩短小鼠BT、CT时间,与空白对照组比,HLRE 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg剂量组分别使BT缩短5.47%、22.67%、39.33%,高、中剂量组有统计学差异(P<0.05);使CT缩短14.33%、17.30%、22.77%,高剂量组有统计学差异(P<0.05)。HLRE 0.75g/kg、1.5g/kg、3g/kg大鼠灌胃给药7、14、21天都能增加FIB含量、缩短TT,具有较好的量效关系。给药21天后各组可见PT缩短。 总环烯醚萜苷(P2)2.0g/kg小鼠灌胃给药7天能显著缩短BT、CT时间;0.35g/kg、0.7g/kg、1.4g/kg大鼠灌胃给药14天能增加FIB、缩短TT,具有较好的量效关系。同时与空白对照组比,P21.4g/kg剂量组APTT延长有显著性差异(P<0.05)。 (2)HlRE小鼠腹腔给药LD50为3.654g/kg,最大耐受剂量为1.44g/kg;P2小鼠灌胃未测出最大耐受量和LD50;P2腹腔给药LD50为7.834g/kg,最大耐受量为5.31g/kg。
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