HBV持续性感染的机制尚有待研究。HBV感染的过程非常复杂,目前按照病史将其分为三个阶段的方法越来越被各界所接受,即将其分为：免疫耐受期,免疫活化期和低活动期。在免疫耐受期,大部分病人体内病毒具有成熟的逃逸机制来避免被免疫细胞清除,从而发展成持续性感染状态。过去研究认为,NK细胞在慢性乙肝感染中扮演着重要的角色,然而NK细胞在免疫耐受中所起到作用以及免疫耐受的机制都缺乏进一步的研究。NK细胞是抗病毒天然免疫反应中最早发挥作用的免疫细胞。NK细胞杀伤靶细胞功能的活化需要多个活化性受体信号的激活,例如NKG2D和CD244共活化。为了研究持续性11BV感染中天然免疫反应所发挥的作用,我们检测了154例HBV病人和95例正常人样品。结果发现,免疫耐受病人外周血NK细胞上NKG2D和CD244表达明显下降,并且其对应的接头蛋白DAP10和SAP也较正常人显著降低。随后对于功能的检测发现,耐受病人NK细胞分泌干扰素和杀伤功能都显著下降。这种表型和功能的改变应该与病人体内的高TGF-β1表达有关,如果用TGF-β1中和性抗体作用,可以部分恢复表型和功能缺陷。这些研究发现为日后完善新颖的临床治疗手段提供了理论基础。在本研究工作中,我们提供充分的研究证据证明,高水平的TGF-β1可以降低NK细胞上NKG2D和CD244的表达,并最终导致病人的HBV持续性感染状态：(一)我们首先发现免疫耐受病人外周血中NK细胞的NKG2D和CD244表达相对于正常人,免疫活化病人和低活动期病人显著下降,并且NKG2D和CD244的表达下降还伴随着其接头蛋白DAP10和SAP的表达降低。提示我们其NK细胞的活化性信号通路受到影响。(二)我们发现病人体内交联共刺激信号并不能发挥正常的功能,交联二抗不能活化免疫耐受病人NK细胞中的NKG2D和CD244共刺激信号,而且没有明显的钙离子流出现,说明免疫耐受期病人的NK细胞不能有效活化且处于耐受状态,并且免疫耐受病人NK细胞杀伤51Cr标记的K562细胞以及分泌IFN-γ的能力均显著下降。这些结果表明,免疫耐受期病人NK细胞的表型改变可能伴随着NK细胞功能的改变。(三)加入TGF-β1中和抗体,可以一定程度上恢复NKG2D和CD244表达。我们用CBA多细胞因子检测和ELISA实验来检测病人和正常人血清中TGF-β1的表达情况,结果显示,免疫耐受病人体内TGF-β1表达要显著高于其他细胞因子,也显著高于其他分期的病人和正常人。加入TGF-β1中和抗体后,可以部分恢复NK细胞的功能。(四)我们通过免疫印迹实验检测免疫耐受病人的NK细胞,研究结果发现TGF-β通过上调NK细胞中周期抑制蛋白p15和p21的高表达,从而抑制NK细胞的周期进程。综上所述,这些研究结果证明TGF-β1信号促进了免疫耐受病人NK细胞的功能缺陷和表型改变,并最终导致病人体内的持续性感染状态。我们的研究结果为进一步完善目前的临床治疗方法提供了科研基础和治疗方向。