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研究目的:1.检测IBS-D患者与健康组血清microRNA,筛选出两组间microRNA差异表达谱系,为未来IBS-D患者的精确诊断和治疗提供参考依据;2.通过针刺干预IBS-D患者,检测患者针刺前后的血清microRNA表达,探讨针刺对患者循环microRNA表达的影响,阐.释针刺疗法治疗IBS-D的作用机制。研究方法:1.通过临床纳入IBS-D患者和健康对照组,抽取患者一定量血液,分离血清,采取混合血清样本的方法,通过基因芯片检测,分析IBS-D患者和健康对照组之间的microRNA差异表达谱系和差异表达倍数。2.纳入的IBS-D患者予调神健脾针刺法,每周3次,治疗6周,共计18次。通过治疗前后的IBS-SSS量表评价患者病情改善情况,评估治疗效果,再次抽取患者血液标本,分离血清后,对治疗前后样本分别进行实时荧光定量RT-PCR检测,一方面验证基因芯片检测结果,另一方面分析针刺治疗后患者血清异常表达的miRNA与治疗前的倍数差异。研究结果:1.本次临床研究共纳入IBS-D组患者23例,健康对照组19例。其中两组性别和年龄无显著差异(P>0.05)。2.通过基因芯片检测,发现IBS-D患者与正常组之间比较,出现了 15个明显表达差异的microRNA,分别是 miR-1305、miR-575、miR-149、miR-190、miR-135a、miR-210、miR-148a、miR-151-3p、miR-22、miR-483-3p、miR-194、miR-887、miR-1、miR-127-5p、miR-892b。其中 IBS-D 组 miR-1305、miR-575、miR-149、miR-190、miR-135a、miR-210、miR-148a、miR-151-3p相比正常组表达显著上调(上调倍数大于2倍);miR-22、miR-483-3p、miR-194、miR-887、miR-1、miR-127-5p、miR-892b 表达显著下调(下调倍数小于0.5倍)。3.通过针刺干预,IBS-D组患者症状较前明显改善,针刺治疗之前IBS-SSS评分为(241.52±67.17),针刺干预之后为(73.70±45.98),有效率达到91.30%。前后对比分析有统计学意义P<0.01。4.通过实时荧光定量PCR研究对比针刺治疗前后IBS-D患者血清miRNA,发现miR-210、miR-148a相比治疗前表达明显下调(P<0.05);miR-22、miR-194相比治疗前显著上调(P<0.05)研究结论:1.IBS-D患者和正常组之间部分血清miRNA表达出现明显的异常,表明microRNA自身浓度的改变导致靶基因表达出现变化,从而导致了 IBS-D相关病理机制以及症状的出现。2.针刺治疗可以从整体上改善患者相关症状,效果明显。3.针刺可能通过调控IBS-D患者体内miRNA的表达,间接调控了下游蛋白分子的表达,从而起到了改善相关症状的作用。结合相关研究表明具体机制可能是针刺通过调控针灸-miRNA-免疫调节、针灸-miRNA-神经系统保护、针灸-miRNA-细胞保护、针灸-miRNA-肿瘤抑制等通路从而起到治疗IBS-D的作用。