癌症是威胁人类健康与生命的一类重大疾病,目前尚无彻底治愈的方法,因此发现新的具有抗肿瘤活性的化合物以及研究其抗肿瘤机制是目前相关药物研发的主要方向。p53基因是一种抑癌基因,与人类肿瘤密切相关,其功能包括维持基因组稳定、抑制并且阻止细胞转化。超过一半的人类肿瘤与p53基因的突变有关,并且另一半p53基因未突变的肿瘤中,p53基因的表达和功能受到了明显的抑制。MDM2是p53基因的关键负反馈调节因子。在肿瘤细胞中,MDM2基因高表达,影响了p53蛋白的抑癌效果。而p53-MDM2相互作用的抑制剂能将p53蛋白从MDM2的抑制中释放出来,重新恢复p53蛋白“基因组卫士”的功能,故p53-MDM2相互作用一直是抗癌药物研发的重要靶标。目前已发现多种新型的p53-MDM2抑制剂,但仍没有相关药物上市。本课题对cyz系列化合物使用p53-MDM2通路抑制剂筛选细胞模型进行筛选,得到能诱导p53进入细胞核的化合物;并通过cck8法测定活性化合物的抗肿瘤细胞增殖活性,运用免疫印迹、免疫组化等方法验证p53、MDM2和p21蛋白的表达量的变化,从而验证化合物对p53通路的激活作用。并且通过检测Bax、Bcl-2等蛋白的表达量变化以及利用一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒测定了化合物对细胞凋亡的作用,使用流式细胞仪等检测了化合物对细胞周期的影响,通过建立人结直肠癌细胞HCT116皮下异种移植瘤模型,测定化合物的体内抗肿瘤活性。在本课题中,我们还对化合物导致的细胞聚合现象使用细胞免疫荧光检测、活细胞连续拍照等方法进行了初步研究。结果表明:筛选到的新型p53-MDM2相互作用小分子抑制剂cyz2017具有良好的体外抗肿瘤药理活性,显著抑制p53野生型肿瘤细胞的增殖。它显著升高这些细胞中p53和其下游蛋白MDM2及p21的表达水平,证实它能激活p53通路。它还能诱导细胞周期阻滞,促进细胞凋亡。在动物实验中,cyz2017还表现出了良好的体内抗肿瘤活性,与对照组相比能有效抑制肿瘤的生长。此外,我们还发现并且初步研究了cyz2017化合物对肿瘤细胞的聚合作用,明确了化合物促进肿瘤细胞聚合的作用可能与p53蛋白无关,但是可能和结肠癌细胞有关。本研究发现并初步探讨了二甲基胺类化合物cyz2017的抗肿瘤作用,为开发新型靶向p53-MDM2相互作用的抗肿瘤药物提供初步理论基础。但cyz2017化合物的具体抗肿瘤机制及对结肠癌细胞的聚合作用的分子机理,有待后续进一步深入研究。