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目的：建立大鼠脑缺血再灌注模型并将外源性的HIF-1α质粒通过颈外-颈内动脉途径注射入大鼠缺血脑组织中，应用western bolt技术检测脑缺血再灌注后6h、24h、48h、72h和7d时，梗死区脑组织中HIF-1α和VEGF的蛋白表达水平；探索外源性HIF-1α基因对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织的保护机制。方法：1经过测序后，将体外合成HIF-1α的cDNA，克隆入真核表达载体pcDNA3.1，克隆片段大小：2.5kb；酶切鉴定重组子，根据需要进行体外扩增。2大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型（MCAO）制作：选取280-330克雄性Wistar大鼠，以10%水合氯醛腹腔麻醉，颈部皮肤剪毛消毒后正中切开，依次分离暴露颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，丝线结扎颈外动脉远端，经颈外动脉剪口向颈内动脉插入线栓，线栓头端距血管分叉处19±0.5mm，即可阻塞大脑中动脉。MCAO模型建立2h后，按Zea Longa法对大鼠进行神经功能缺失评分，评分为1－4分者为MCAO成功模型，2h后取出线栓并注入HIF-1α质粒，对照组注入PBS。3留取6h、24h、48h、72h和7d脑组织标本观察，将相应时间点实验组与对照组大鼠处死后断头取脑，视交叉后做2mm厚连续切片，做TTC染色。4取相同时间点大鼠梗死区域脑组织，置于-80℃超低温冰箱中保存。5采用western bolt技术检测梗死区脑组织中HIF-1α和VEGF的蛋白表达水平。6统计学分析：使用SPSS17.0统计软件对实验数据进行统计学分析。组间计量资料比较采用t检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。结果：1按Zea Longa评分标准对大鼠神经功能缺失进行评分，选取再灌注模型建立后6h，24h，48h，72h，7d时间点进行观察，在死亡率上，实验组与对照组无明显差别，实验组与对照组神经功能缺失评分亦无明显差别。2对实验组与对照组大鼠脑切片进行TTC染色，在缺血再灌注早期（6h—24h）两组大鼠脑组织梗塞面积无明显差别，再灌注72h以后可见实验组梗塞面积小于对照组。3采用western bolt技术检测梗死区脑组织中HIF-1α和VEGF的蛋白表达水平，在缺血再灌注后6h、24h、48h、72h以及7天，实验组HIF-1α以及其靶基因VEGF表达均显著高于对照组，并在缺血再灌注24h时达到表达高峰，采用方差分析对实验数据进行分析得出，实验组各时间点HIF-1α和VEGF的蛋白表达与对照组相比，具有统计学意义（P<0.05），各时间点组间对照分析具有统计学意义（P<0.05）；对HIF-1α及VEGF两种蛋白表达水平进行相关性分析，结果表明VEGF表达与HIF-1α表达具有相关性。结论：1经颈外-颈内动脉注射外源性HIF-1α质粒后，实验组与对照组大鼠的生存率以及神经功能评分无明显差异。2大鼠脑缺血再灌注损伤后，经颈外-颈内动脉注射外源性HIF-1α质粒，HIF-1α可在缺血再灌注脑组织中稳定表达。3大鼠脑缺血再灌注损伤后，外源性HIF-1α可以有效调控VEGF蛋白稳定表达。