产纤维素酶微生物的选育及其发酵纤维素的研究

来源 :东南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blue_violet
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以南京红山森林动物园食草动物粪便及土样作为菌源,采集样品,通过CMC选择培养基与滤纸培养基分离纯化得到降解纤维素的菌株。用刚果红染色法测定菌株在CMC选择培养基上透明圈直径与菌落直径,据此初步判定产酶活力。再将菌株接种至液体产酶培养基中复筛,测定各菌株的CMC酶活力。综合比较,C3产酶活力相对较高,故将C3作为后续育种的出发菌株。形态鉴定表明,C3为青霉。   为了提高微生物产CMC酶能力,以自然选育的C3为出发菌株,通过紫外线处理,得到时间与致死率的关系。选择不同致死率的诱变剂量对菌株进行诱变处理,经过初筛和复筛,得到产酶活力较高的5株突变株,分别为Mu52、Mu53、Mu83、Mu85、Mu94,其CMC酶活力分别是出发菌株的1.30、1.18、1.12、1.48及1.56倍。   从形态、产气情况与发酵葡萄糖能力方面对酵母菌进行研究,在温度30℃、转速100r/min、接种量3%,培养时间为3d,该菌发酵葡萄糖后的乙醇产率达88.8%。将鉴定的酵母与紫外诱变突变株94采用PEG法进行原生质体融合,并对融合子进行性能检测,筛选出相对活性较好的融合子。将稻草秸秆机械粉碎后用稀硫酸预处理,将选育得到的融合子用于直接发酵稻草秸秆和粉碎了的皱纹纸研究。发酵结果表明,F15用于稻草和皱纹纸发酵具有相对较好的结果;在10%的接种量条件下,稻草秸秆发酵后的乙醇产率为10.5%;皱纹纸发酵后的乙醇产率为11.2%,比稻草秸秆提高了5.88%。
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