子痫前期(PE)为妊娠期特有的疾病，发病率大约为5％-8％，是导致孕产妇及围产儿患病率和死亡率升高的主要原因，严重危害母婴健康。其中早发型子痫前期发病早，病情更为严重。目前该病病因不明、尚无早期的诊断标准，一经检出母儿已受到不同程度损伤，寻找一种能在PE发病前对疾病做出早期预测的特异、无创、快速的诊断方法具有重要的临床意义。胎儿游离核酸(cell free fetal DNA，cffDNA)作为一种极具潜力的生物预测指标物已被逐渐认识。　　本课题通过分析孕前、孕期高危因素与子痫前期的相关性，建立其风险预钡的初步模型，综合评价高危因素、cffDNA与子痫前期的关联性，为高危人群的筛查及预测提供可靠的途径。　　采用病例对照研究及临床流行病学调查的方法，收集2004年11月～2012年6月在东南大学附属中大医院妇产科住院分娩的妊娠22+3周～妊娠41+3周孕妇472例为研究对象，其中病例组179例，对照组293例。选择2010年11月～2011年1月在我院产前诊断中心就诊的妊娠15周～20+6周的孕妇1011例，对其中20例妊娠男性胎儿之后发展为早发型子痫前期的患者与20例妊娠男性胎儿的正常妊娠孕妇，采用实时荧光定量PCR技术利用特异性Y性别决定区(SRY133)基因对中孕期母血清中cffDNA进行定量测定;采用多因素Logistic回归进行多因素分析，并同时计算优势比(OR)及95％可信区间(95％C(l))。分析计量资料进行正态性检验，符合正态分布的均以((x)±s)表示，采用T检验;不符合正态分布的用中位数与四分位间距表示，采用秩和检验，并进行pearson相关性分析。所有统计学分析使用SPSS软件完成。　　研究结果显示:　　1.孕前BMI≥24kg/m2，有高血压、糖尿病、肾炎疾病史，有自然流产史及高血压家族史是子痫前期发病的危险因素，多因素分析结果显示:孕前BMI≥24kg/m2OR13.014[95％CI(6.442，26.294)]，高血压、糖尿病、肾炎疾病史OR12.437[95％CI(1.414，109.377)]，自然流产史OR15.564[95％CI(7.995，30.299)]，高血压家族史OR3.754[95％CI(2.100，6.710)]。提示应加强对此人群的孕前及孕期保健，以预防及早期预测子痫前期的发生。　　2.早发型子痫前期患者中孕期母血清cffDNA水平明显高于正常妊娠妇女（中位数3.08，四分位间距2.93-3.68vs中位数1.79，四分位间距1.46-2.53，p＜0.001）。且当判断界值(1-特异度)为0.150时，灵敏度为90.0％，特异度为85.0％。cffDNA作为一种无创性产前诊断检测指标，与早发型子痫前期的发生密切相关，是理想的早期预测的生物学指标。　　3.对早发型子痫前期组及正常妊娠组中孕母血清cffDNA水平与新生儿体重和分娩周数进行相关性分析，发现cffDNA水平与新生儿体重和分娩周数呈负相关，(pearson相关系数=-0.388，P=0.013vspearson相关系数=-0.440，P=0.004)。提示cffDNA对新生儿体重与分娩周数具有预测作用。　　第二部分KIR、HLA-C基因及其组合与子痫前期的相关性研究　　来自流行病学研究、动物模型及相关分子机制的研究均支持免疫遗传因素与子痫前期密切相关。正常妊娠时，uNK(uterine natural killer)细胞在着床期大量浸润子宫蜕膜，参与子宫螺旋小动脉的生理重铸，对胎盘的着床过程及以后的正常生长分化起着重要作用。uNK细胞上表达多种受体，其中杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)可以特异性识别绒毛外滋养细胞上的人类白细胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)分子，构成了KIR-HLA信号系统，调控uNK细胞的活化。KIR、HLA-C基因都具有高度多态性，不同KIR、HLA分子结合的亲和力不同。因此，孕妇KIR和胎儿的HLA-C基因多态性共同影响uNK细胞的活化，从而可能对子痫前期的发生产生影响。　　为了探索免疫遗传因素在子痫前期发病中的作用。选择2008年2月～2011年4月在我院住院分娩的子痫前期及正常妊娠孕妇及其配偶、胎儿共303例，其中子痫前期孕妇、配偶及胎儿47例，健康孕妇、配偶及胎儿54例为对照组进行病例对照研究。对研究对象采用引物特异性PCR方法检测12个KIR基因及基于测序的分型方法进行HLA-C位点高分辨率分型，采用x2检验或Fishers精确概率法分析各遗传因素组间差异的显著性。　　研究结果显示:　　1.采用PCR-SSP方法分析12种KIR基因在两组人群中的分布，子痫前期组孕妇活化性受体KIR2DS1的基因频率显著低于对照组，分别是19.1％和39.6％，P=0.028，OR0.36[95％CI(0.15，0.90)]，孕妇KIR抑制型受体AA型频率与对照组相比显著增加，分别是52.2％和28.0％，P=0.017，OR2.81[95％CI(1.20，6.54)]。　　2.采用PCR-SBT方法分析经典HLAI类等位基因在两组人群中的分布，孕妇HLA-C等位基因C*03:04:01G的频率显著高于对照组，分别是13.2％和2.7％，P=0.019，OR5.492[95％CI(1.14，26.40)];父亲HLA-C的等位基因C*08:01:01G的频率显著高于对照组，分别是14.7％和2.7％，P=0.034，OR6.25[95％CI(1.15,34.12)]。　　3.采用交叉分析的方法发现当胎儿比母亲有较多的HLA-C2基因，并且母亲的KIR基因型为AA时，子痫前期的发病风险明显增加，P=0.021。考虑胎儿增加的HLA-C2基因来源于孕妇配偶，即父源的C2基因与子痫前期的发病风险相关。　　本研究分析孕前、孕期高危因素与子痫前期的相关性，建立其风险预测的初步模型，综合评价高危因素、cffDNA与子痫前期的关联性，结果显示高危因素、cffDNA为子痫前期高危人群的筛查及预测提供可靠的途径;研究孕妇、配偶及胎儿的KIR、HLA基因及其组合与子痫前期的相关性，结果提示，KIR-HLA信号系统在子痫前期的发生中发挥重要作用，探索免疫遗传因素在该病发病机制的新思路，同时也为发展新的临床治疗策略提供理论依据。