川牛膝炮制前后有效成分比较研究和中药饮片管理探讨

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yhl0921
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目的:本实验主要是通过比较酒炙对川牛膝饮片主要化学成分含量的影响,考察炮制前后各指标成分的变化;建立炮制前后高效液相指纹图谱并分析炮制前后指纹图谱的其差异;同时对不同商品规格川牛膝及川牛膝药材不同部位中有效成分的含量进行比较。为研究川牛膝酒炙原理打下基础,为川牛膝酒炙规范化研究提供实验数据,为正确评定川牛膝商品规格,制定川牛膝质量标准提供科学依据,为中医临床正确应用牛膝炮制品提供实验依据。同时,对于目前中药饮片GMP生产和认证中存在的问题进行评价和分析。  方法:查阅古代文献和现代文献并进行分析整理,总结前人炮制经验,撰写文献综述。购入饮片和药材,按文献方法进行炮制。采用HPLC法,筛选提取工艺和色谱条件,测定川牛膝药材、不同规格饮片和酒炙品中阿魏酸、杯苋甾酮的含量,确定酒炙对川牛膝阿魏酸、杯苋甾酮的影响和不同规格川牛膝中阿魏酸、杯苋甾酮含量的差异。采用HPLC法,初步研究了川牛膝商品等级与其有效成分含量的联系。采用HPLC法,建立川牛膝饮片和酒川牛膝饮片指纹图谱,并对其相似度进行评价。查阅资料和实地调查,对中药饮片GMP生产和认证过程中出现的问题进行总结和分析进行了总结和分析。  结果:完成“川牛膝现代研究进展”文献综述1篇。  确定阿魏酸含量测定的前处理方法:碱提酸沉后用氯仿萃取精制。阿魏酸的HPLC条件为:流动相甲醇:0.4%醋酸水(40:60),检测波长360nm,流速1.0ml/min,柱温为35℃。阿魏酸在2.368μg~7.104μg内线性范围良好(R2=0.9999)。含量测定结果为川牛膝生品中阿魏酸含量约为0.574%~0.796%,平均含量为0.669%。川牛膝酒炙品中阿魏酸含量约为0.589%~0.849%,平均含量为0.713%。  确定杯苋甾酮含量测定的前处理方法为甲醇回流法。杯苋甾酮含量测定的色谱条件为:流动相甲醇:水(37:63)检测波长243nm,流速1.0ml/min,柱温35℃。杯苋甾酮在1.180μg~4.130μg范围内线性良好(R2=1)杯苋甾酮含量测定的结果为:生品杯苋甾酮含量约为0.037%~0.062%,平均含量为0.048%,酒炙品杯苋甾酮含量为0.041%~0.081%,平均含量为0.054%。  川牛膝芦头中所含杯苋甾酮含量为0.024%,须根中杯苋甾酮含量为0.051%,杯苋甾酮含量一等药材﹤二等药材﹤三等药材,阿魏酸含量三等药材﹤二等药材﹤一等药材。川牛膝饮片统货和选货所含杯苋甾酮和阿魏酸无明显差异。  确定川牛膝指纹图谱的前处理方法为甲醇热回流提取。建立了川牛膝指纹图谱的色谱方法,明确指出其含有7个共有峰,并建立其共有模式,初步建立了川牛膝指纹图谱及其质量评价方法。同时在290nm处发现生品和制品色谱图的不同,为研究川牛膝酒炙原理起到了一定的推动作用。  撰写出“中药饮片GMP生产现状思考”综述。通过对中药饮片GMP生产和认证过程中出现的问题进行总结和分析,就饮片行业发展的现状和前景提出了自己的看法进行了思考。  结论:酒炙对川牛膝化学成分产生了影响。酒炙后杯苋甾酮和阿魏酸含量略有升高,同时指纹图谱中有新的色谱峰产生。川牛膝饮片中阿魏酸和杯苋甾酮含量与其商品规格有一定关联,饮片统货与选货间无明显差异。同时认为GMP认证确实提高了饮片的质量,建议在规范生产的同时,改善检测方法,加强对市场的监管力度。
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