本论文对阪崎肠杆菌的免疫分析方法进行了初步的研究,通过免疫制备了高效价和高特异性的抗阪崎肠杆菌的多克隆抗体。通过对免疫分析条件的优化,建立了一种简便、快捷、实用的阪崎肠杆菌间接酶联免疫检测方法。抗体的效价是1：243000。最佳抗体浓度为0.0267μg/mL;选择1%脱脂乳粉为封闭液,封闭时间选择30min;抗体作用时间为1h；酶标抗体作用30min。该间接ELISA方法在纯培养物中的最低检测限是104-105CFU/mL。同其它的12株非阪崎肠杆菌(大肠杆菌、弗氏枸橼檬酸杆菌、阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、福氏志贺氏菌、成团肠杆菌、肠炎沙门菌、沙雷氏菌、蜡状芽孢杆菌、八叠球菌、无乳链球菌、停乳链球菌)没有交叉反应。此结果说明制备的抗体特异性好,对所有属内菌种有很好的结合力,对属外菌种没有交叉。整个检测过程可以在6个小时之内完成。按照10、1、0.1CFU/g的样品接种量接种至经传统检验不含阪崎肠杆菌的纯牛奶、全脂乳粉、乳清蛋白粉里,所有的奶制品在改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素培养基(mLST-Vm)中培养20h后都可检测到阪崎肠杆菌的存在。同传统常规培养检测方法相比,该间接酶联免疫方法是快速、灵敏、特异的检测奶制品中阪崎肠杆菌的方法。用五种不同样品分别进行重复性实验,结果表明此方法具有良好的重复性。该方法可以用来快速的筛检奶制品中阪崎肠杆菌的存在。