【摘 要】
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目的:牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）是牙周病的主要致病菌,是动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的一项独立危险因素。研究表明线粒体功能障碍在AS致病中起重要作用,但P.gingivalis感染促进AS发生、发展的具体机制以及线粒体功能障碍是否在其中发挥作用还尚不明了。本研究的目的是探索P.gingivalis感染对内皮细
【基金项目】
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国家自然科学基金（NO.81970943）；
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目的:牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）是牙周病的主要致病菌,是动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的一项独立危险因素。研究表明线粒体功能障碍在AS致病中起重要作用,但P.gingivalis感染促进AS发生、发展的具体机制以及线粒体功能障碍是否在其中发挥作用还尚不明了。本研究的目的是探索P.gingivalis感染对内皮细胞线粒体功能的影响及其可能机制,探讨P.gingivalis感染促进AS发生、发展的可能途径。方法:选择P.gingivalis ATCC 33277菌株以感染复数100:1感染内皮细胞EA.hy926 2 h、6 h、12 h、24 h。透射电镜观察EA.hy926细胞线粒体超微结构改变;Mito-Tracker Red CMXRos染色共聚焦显微镜检测线粒体片段化改变;流式细胞仪和共聚焦显微镜分析线粒体活性氧（reactive oxygen species,mt ROS）和膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）的水平。蛋白印记法和免疫荧光染色检测线粒体融合和分裂蛋白水平及分布。利用Drp1特异性抑制剂Mdivi-1预处理细胞监测P.gingivalis感染后细胞线粒体形态及功能变化以验证Drp1的作用。结果:1.P.gingivalis感染导致线粒体片段化、分裂增加。2.P.gingivalis感染导致mt ROS过度累积,MMP水平下降。3、分裂蛋白Drp1（ser616）磷酸化水平在P.gingivalis感染后显著上调,且向线粒体易位。4、Mdivi-1阻断了由P.gingivalis感染导致的线粒体分裂增加及功能障碍。结论:1.P.gingivalis感染促进内皮细胞线粒体分裂增加以及功能障碍。2.线粒体分裂蛋白Drp1（ser616）磷酸化参与P.gingivalis促内皮细胞线粒体分裂和功能障碍。
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