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微流控芯片(Microfluidic chip)又称芯片实验室(Lab on a chip),是把化学和生物等领域中所涉及的样品制备、反应、分离、检测及细胞培养、分选、裂解等基本操作单元集成在一片芯片上。由于具有样品用量少、分离效率高、分析速度快、自动化程度高等优点,被认为是当代分析科学中最具有活力的前沿课题之一,在生命科学、临床医学、药学分析、环境监测等领域展现出巨大的优势。本论文采用微流控芯片技术对天然药物中的有效成分进行了分析,包括以下四章,主要内容如下:
1.总结了微流控芯片发展简史和应用现状以及本论文的研究目的和意义,并对微流控芯片的材料、进样方式、分离方式和检测方式作了简要的概述。
2.重点介绍了非接触电导检测的相关理论,评述了非接触电导检测器研究的发展现状和趋势。
3.建立了利用微流控芯片非接触式电导法测定几种中药材中甜菜碱含量的方法,研究和优化了分离检测条件。对枸杞、肉苁蓉、怀牛膝、土牛膝、灵芝、海桐皮和地骨皮7种中药材中的甜菜碱在50 s内可实现分离检测。分离条件为:缓冲溶液20 mmol/L MES-20 mmol/L His,分离电压3.0 kV。检测条件为:激发频率60 kHz,激发电压60 Vp-p。甜菜碱的线性范围为10~2500μg/mL,线性方程为Y=38.1+0.128X,相关系数r=0.996,检出限为1.0μg/mL(S/N=3)。用于几种中药材的测定回收率为92%~107%。本方法快速简便,样品处理简单,为这几种药材的质量控制提供了比较准确的定量方法。
4.建立了微流控芯片非接触式电导法测定中药材中的葫芦巴碱含量的分析方法,对胡芦巴、天南星、桑叶、使君子等四种药材进行分离检测。研究了缓冲液的种类与浓度、添加剂种类与添加量、分离电压和中药提取方法等因素的影响。优化选择缓冲溶液为20 mmol/L MES-20 mmol/L His,分离电压3.0 kV,检测频率60 kHz,激发电压60 Vp-p。葫芦巴碱在10.0~2000μg/mL范围内,峰面积(Y)与浓度(X,μg/mL)呈良好线性关系,线性方程为Y=30.1+0.0747X,线性相关系数为0.998,检出限为10.0μg/mL(S/N=3)。用于4种中药材的测定,回收率为97%~103%。此方法具有简便、快速、高效、廉价等优点,可用于上述中药材的质量控制与评价。