目的：通过构建高表达维甲酸相关孤核受体α（Retinoid-related orphan receptor A, RORα）人胃癌MGC803细胞，观察RORα表达在二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭中的作用，以及DADS上调RORα对Wnt/β-catenin通路的影响，探讨和揭示DADS抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭的分子机制。　　方法：构建含有编码人RORα蛋白的RORA基因CDS序列的pcDNA3.1-RORα真核表达载体。将pcDNA3.1-RORα真核表达载体转染MGC803细胞，筛选获得RORα蛋白高表达稳定转染细胞RORα/MGC803细胞。Real-time PCR和Western blotting检测细胞中RORαmRNA和蛋白的表达。MTT法、软琼脂集落形成实验、流式细胞术、划痕愈合实验和 Transwell侵袭小室实验检测DADS处理前后，RORα高表达对 MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭能力的影响。利用RNA干扰技术建立稳定的RORα表达下调的miRii-RORα/MGC803细胞。MTT法、软琼脂集落形成实验、流式细胞术、划痕愈合实验和Transwell侵袭小室实验检测DADS处理前后，干扰RORα的表达对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭能力的影响。RT-PCR和Western blotting检测DADS处理前后，调控RORα表达对Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、Vimentin、Axin、c-Jun、MMP-9和TIMP-3等分子的影响。利用荧光素酶报告基因，检测DADS处理前后对c-Myc启动子活性的影响。　　结果：　　1.成功构建稳定RORα高表达的RORα/MGC803细胞。　　酶切和测序结果证实，成功构建pcDNA3.1-RORα真核表达载体。pcDNA3.1-RORα真核表达载体转染 MGC803细胞，Real-time PCR和 Westernblotting检测显示，RORα/MGC803细胞中RORα mRNA和蛋白表达量增高，提示成功获得RORα高表达的稳定细胞株RORα/MGC803。　　2.RORα高表达对MGC803细胞增殖与迁移侵袭能力的影响。　　MTT显示，DADS未处理2、3与4d后，RORα高表达MGC803细胞的增殖率分别为0.347±0.051、0.581±0.024与0.698±0.046，明显低于 MGC803组0.631±0.068、1.129±0.017与1.974±0.045和空质粒组0.647±0.027、1.211±0.031与2.033±0.038（P<0.05）。DADS作用2、3与4d后，MGC803组和空质粒组增殖率分别为0.328±0.047、0.531±0.064与0.653±0.086和0.314±0.019、0.547±0.046与0.649±0.057，增殖活性均明显减弱（P<0.05）。高表达组在DADS作用前后差异不显著。　　软琼脂集落形成实验显示，DADS未处理时，RORα高表达细胞的集落形成率为5.2±0.8，明显低于对照组14.9±1.7和空质粒组15.2±1.4（P<0.05）。DADS作用后，对照组和空质粒组的集落形成率分别为5.3±1.1和5.6±0.7，集落形成能力均明显减弱（P<0.05）。高表达组在DADS作用前后差异不明显。　　流式细胞术检测显示，DADS未处理时，RORα高表达MGC803细胞G2/M期百分率为42.1％，明显高于对照组21.5%和空质粒组22.4%(P<0.05)，表明RORα高表达可阻滞MGC803细胞于G2/M期。DADS作用后，对照组和空质粒组G2/M期百分率分别为44.0%与41.9%，均出现明显的G2/M期阻滞（P<0.05）。高表达组DADS作用前后差异不显著。　　划痕愈合实验显示，24h后，RORα高表达细胞的迁移距离53±11μm明显较MGC803组132±14μm与空质粒组细胞137±9μm减少（P<0.05）。DADS作用后，MGC803组和空质粒组的迁移距离分别为58±8μm和54±10μm，迁移能力均明显减弱（P<0.05）。高表达组在DADS作用前后的差异不显著。　　侵袭实验显示，高表达组细胞穿膜细胞数37±9个较MGC803组147±17与空质粒组144±18明显减少（P<0.05）。DADS作用后，MGC803组和空质粒组穿膜细胞分别为35±4和34±6个，侵袭能力均明显减弱（P<0.05）。高表达组在DADS作用前后的差异不显著。　　3.沉默RORα对DADS抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭的作用　　RT-PCR与Western blot显示，干扰RORα的MGC803细胞中，RORαmRNA和蛋白表达水平显著下调，表明干扰RORα可明显的抑制RORα表达(P<0.05)。而MGC803细胞与空质粒组RORαmRNA和蛋白表达无明显改变。　　MTT显示，干扰RORα后，细胞的增殖活性明显高于MGC803组和空质粒组（P<0.05）。DADS处理1、2、3和4天后，干扰RORα的细胞增殖抑制率分别为25.31%、34.66%、33.31%和46.64%，明显低于MGC803细胞的30.21%、48.02%、52.97%与66.92%和空质粒细胞的28.25%、42.18%、49.36%与65.31%（P<0.05）。表明沉默RORα可降低DADS抑制MGC803细胞增殖作用。　　软琼脂集落形成实验显示，DADS作用前，干扰RORα细胞的相对集落形成率128.1%，明显高于MGC803组和空质粒组（P<0.05）。DADS作用后，MGC803组和空质粒组的集落形成率分别明显下降为35.3%和38.9%（P<0.05）。RORα干扰组的集落形成率为53.7%明显低于未处理组（P<0.05），表明RORα下调可降低DADS对MGD803细胞的抑制增殖作用。　　流式细胞术检测显示，DADS未处理时，RORα干扰组S期和G2/M期细胞百分率分别为39.9%与27.6%，较MGC803组26.1%与21.5%和空质粒组27.4%与20.7%明显增加（P<0.05），提示干扰RORα可促进MGC803细胞的增殖。DADS作用后，RORα干扰组G2/M期细胞比例35.1%明显低于MGC803组44.0%和空质粒组43.6%细胞（P<0.05），表明干扰RORα可削弱DADS阻滞对MGC803细胞G2/M期作用。　　划痕愈合实验显示，划痕24h后，干扰RORα组迁移距离1.76±0.19mm明显高于 MGC803组1.32±0.14mm和空质粒组细胞1.29±0.17mm（P<0.05）。DADS作用后，MGC803组和空质粒组细胞迁移距离分别明显减少为0.58±0.08mm和0.61±0.07mm（P<0.05）。干扰RORα组细胞迁移距离0.95±0.09mm明显小于处理前干扰组和处理后MGC803组（P<0.05）。表明沉默RORα可减弱DADS抑制MGC803细胞迁移作用。　　侵袭实验显示，干扰 RORα组穿膜细胞172±27个明显多于 MGC803组147±17个和空质粒组149±14个，表明干扰组细胞的侵袭能力明显增强（P<0.05）。DADS作用后，MGC803组和空质粒组穿膜细胞明显减少为35±4和37±8个，表明细胞侵袭能力明显减弱（P<0.05），而干扰RORα组97±18个，与处理前干扰RORα组和处理后MGC803组具有显著性差异（P<0.05），提示沉默RORα可减弱DADS抑制MGC803细胞侵袭作用。　　4. DADS与RORα表达对Wnt/β-catenin通路相关分子表达的影响。　　RT-PCR与Western blot显示，DADS与RORα高表达可显著降低Vimentin、Axin、c-Myc、c-Jun、MMP-9 mRNA与蛋白表达（P<0.05）。而沉默RORα可上调Vimentin、Axin、c-Myc、c-Jun、MMP-9 mRNA与蛋白表达（P<0.05）。提示DADS可通过上调RORα作用Wnt/β-catenin通路，抑制胃癌细胞的增殖、迁移与侵袭。RORα不影响β-catenin与磷酸化β-catenin表达。　　萤光素酶报告分析显示，DADS处理前，RORα高表达组荧光值744.93±35.43明显低于 MGC803组1493.54±58.55、空质粒组1389.24±76.42、干扰空质粒组1427.67±56.48与干扰组2517.82±64.17（P<0.05）。干扰组明显高于MGC803组、pcDNA3.1/MGC803组与空质粒组（P<0.05）。表明RORα可抑制c-Myc的启动子活性，而沉默RORα可增强c-Myc的启动子活性。DADS处理后，MGC803组、pcDNA3.1/MGC803组、干扰空质粒组与干扰组荧光值分别为791.36±46.55、813.56±53.48、765.64±73.26与1935.35±93.21，明显低于处理前（P<0.05）。而干扰组的降低程度明显低于各对照组（P<0.05），并且，高表达组明显低于各对照组（P<0.05）。表明DADS可抑制 c-Myc的启动子活性，而沉默 RORα可减弱DADS抑制c-Myc启动子活性作用。　　结论：　　1. RORα高表达可抑制 MGC803细胞增殖与迁移侵袭，其作用与DADS抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭作用类似。　　2.沉默RORα可促进MGC803细胞的增殖与迁移侵袭能力。　　3. RORα表达下调，可减弱DADS抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭作用。　　4. DADS可通过RORα调控Wnt/β-catenin通路抑制胃癌细胞的增殖与迁移侵袭。