两种天然倍半萜的抗肿瘤活性及其生合成中酶的基因克隆

来源 :沈阳药科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huntout
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
抱茎苦荬菜[Crepidiastrum sonchifolium(Bunge)]是菊科苦荬菜属植物,盛产于我国东北、华北。其化学成分复杂多样,其中的倍半萜内酯类化合物有显著的生物活性。 本文利用大孔吸附树脂柱层析、硅胶柱层析等方法从抱茎苦荬菜中分离出含有两个活性倍半萜内酯苷成分的组合物并应用制备高效液相色谱,最终得到两个单一成分的化合物。利用光谱分析对二者进行结构鉴定,认定其分别为1(10),3,11(13)-愈创木三烯-12,6-内酯-2-酮-3-O-吡喃葡萄糖苷(苷1)和1(10),3-愈创木二烯-12,6-内酯-2-酮-3-O-吡喃葡萄糖苷(苷2)。 在活性内酯苷组合物的基础上,将葡萄糖基水解掉,成为内酯苷元组合物,再通过乙酸乙酯萃取,氧化铝柱层析等方法将组合物分离,分别得到两个苷元的单体。利用光谱分析对二者进行结构鉴定,认定其分别为3-羟基-1(10),3,11(13)-愈创木三烯-12,6-内酯-2-酮(苷元1)和3-羟基-1(10),3-愈创木二烯-12,6-内酯-2-酮(苷元2)。 将分离得到的四种化合物进行体外抗肿瘤活性实验。首先利用MTT法,测定它们对肿瘤细胞(A375-S2,Hela和L929)的细胞毒活性。结果表明,内酯苷和苷元对三种细胞都显示出了一定的增殖抑制活性,其中内酯苷元诱导上述细胞死亡呈剂量依赖关系且活性明显高于内酯苷。形态学方法表明内酯苷元组合物诱导A375-S2细胞,HeLa细胞和L929细胞的死亡机制为诱导细胞凋亡。 为研究苷元所诱导的细胞毒活性的机制,本文利用猿猴病毒(SV40)体外DNA复制系统检测了苷元对DNA复制过程的抑制作用,发现苷元1和2均能剂量依赖性地抑制SV40体外DNA复制。为探讨苷元是否通过抑制复制反应所需要的重要的复制蛋白来抑制DNA复制,本文检查了苷元对复制蛋白A(RPA)的单链DNA结合活性的影响。结果表明,苷元1能够剂量依赖性地抑制RPA与单链DNA的结合能力。在浓度达到250μmol/L的时候,超过70%的RPA的单链DNA结合能力被抑制。 为了检测苷元抑制细胞增殖是否通过调节细胞周期的作用,我们利用流式细胞术检测了苷元对A549细胞的细胞周期的影响。结果表明,苷元能够诱导细胞周期阻滞在G2/M期。
其他文献
当前,全世界肿瘤发病率位居第二,仅次于心血管病,已成为威胁人类健康的主要杀手之一。据世界卫生组织统计,全世界有4000多万癌症患者,随着工业化、城市化进程的加快和环境污
本文在证实前列腺癌中癌基因survivin与突变型p53(mt-p53)蛋白表达呈正相关的基础上,通过构建含有双启动子、可同时表达野生型p53蛋白(wt-p53)和小干涉survivin(siRNA-surviv
恶性肿瘤的发病率和死亡率逐年上升,严重威胁人类健康和生命。在其发生和进展过程中,肿瘤细胞和宿主的免疫系统相互影响、相互制约,肿瘤细胞可通过多种机制逃避机体免疫系统的控
乌鲁木齐市水磨沟风景区占地面积3.7平方公里,由“四山一河”组成(水塔山、虹桥山、清泉山、温泉山和水磨河)。风景区历史悠久,从16世纪就有民间记载,距今已有500多年的历史,1733年
用CPPU对红地球葡萄果穗进行处理,结果表明,在花后10~15d(天)以10mg/kg-20mg/kgCPPU浸穗,可使红地球葡萄的坐果率、单果重、穗重及果粒纵横径明显增加,而葡萄果实中可溶性固形物含量略
宫颈癌仍然是发展中国家导致妇女死亡的最常见的恶性肿瘤。临床诊断为Ib~IIa 期的宫颈癌中,约 35%的患者在根治术后出现复发或转移。如何筛选出有复发和转移高危因素的患者,
目的探讨临床药师干预妇产科围手术期预防使用抗菌药物的方法,评价干预措施成效。方法本院于2018年5月开始实施药师干预妇产科围手术期预防使用抗菌药,随机选取2017年12月至2
目的:非小细胞肺癌组织中EGFR基因的检测,研究其突变特点,分析其与性别、年龄、病理类型、吸烟、淋巴转移的相关性,为临床针对EGFR的靶向治疗提供基因检测方法和理论依据。 方