涉及Pizt介导水稻抗稻瘟病通路的突变体材料的创建

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyh_0527
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
利用正向诱变策略和反向遗传策略创建研究水稻抗稻瘟病基因Piz-t抗性分子网络的材料。正向诱变策略是,利用EMS和Y-射线诱变NPB-Piz-t-HA转基因水稻种子,得到M2纯合突变体库;对NPB-Piz-t-HA突变体库进行大规模的筛选,旨在寻找影响抗病基因Piz-t抗性功能的重要元件。反向遗传策略是,选择Ossgtl和Osrarl这两个对许多植物的抗病基因介导的抗性所必须的重要基因,构建其RNAi表达载体,来研究其对基础抗病以及Piz-t介导抗性的影响。本研究主要结果如下:1、筛选鉴定了Pi9-cMyc转基因植株,验证了Pi2-AcV5纯合转基因植株的稳定表达,为进一步创建Pi2-AcV5、Pi9-cMyc突变体奠定了基础。2、构建了Piz-t-HA突变体规模化筛选体系。包括EMS和γ-射线诱变处理的Piz-t-HA纯合M2变体库的建立,Pizt-HA突变体的规模化稻瘟菌接种、抗性鉴定与病斑筛选,以及对Piz-t-HA感病突变体的检测(离体接种、蛋白印迹、测序、杂交验证等方法)等。经过四批次的筛选,并通过候选分子、抗性鉴定,初步获得了M4-1、M4-2、M4-7共3个抗性功能缺失的候选株系,以及32株有待进一步检测的M2植株。3、成功构建了hpRNAi结构的TA克隆载体pC2300-XUN,以及RAR1和SGT1的RNAi植物表达载体:pC2300-XUN-Osrar/-RNAi和pC2300-XUN-Ossgt1-RNAi,并得到了pC2300-XUN-Ossgt1-RNAi转入日本晴以及SC114(携带Piz-t-HA)的转基因阳性克隆植株分别为25株和24株;pC2300-XUN-Osrar1-RNAi转日本晴以及SC114(携带Piz-t-HA)的转基因阳性克隆植株分别为26株和8株。
其他文献
目的:探讨头孢曲松钠不良反应及合理用药措施.方法:本次73例研究对象是2018年5月-2019年7月本院收治的头孢曲松钠不良反应者,分析临床资料,总结不良反应发生规律、制定合理用
该实验以人的HeLa细胞为材料,运用电击转染、荧光原位杂交并结合激光共聚焦显微镜,从DNA、RNA和DNA-RNA个水平对RNA聚合酶Ⅲ的转录位点及其转录子的分布进行研究.结果如下: D
目的:对比探究快速康复护理在妇科腹腔镜患者术后恢复中的应用效果.方法:随机选取我院2019年1月~2019年8月收治的80例患者作为本次对比实验的主要研究对象,采用均分法将其分为
目的:研究射频消融联合肝动脉化疗栓塞对原发性肝癌疗效的影响.方法:48例入组研究对象均为本院收治的原发性肝癌患者.对其进行随机入组分配,各24例.对比组肝动脉化疗栓塞治疗
目的:探讨脊柱转移性肿瘤的病理类型、临床病理特征及鉴别诊断方法.方法:回顾性分析68例脊柱转移性肿瘤的临床病理资料,观察组织形态,采用免疫组化方法进行鉴别诊断.结果:68
我们通过分析人类神经系统发育和疾病相关基因的数据库,发现NP22是一个在中枢神经系统特异表达的CH家族成员,在不同的神经细胞亚群中表达有显著差异,提示了它在中枢神经系统
目的:探讨健康教育干预在慢性胃炎护理干预中的应用价值.方法:将74例慢性胃炎患者分为两组,对比组(37例)行标准护理,探讨组(37例)在对比组基础上实施健康教育干预.对比两种护