广西狂犬病病毒L基因聚合酶活性部位的克隆与序列分析

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本实验对广西毒株狂犬病病毒L基因聚合酶活性部位进行克隆和测序,截取L基因聚合酶活性部位核苷酸和推定的氨基酸序列与国外固定毒株和类狂犬病毒株进行比较分析。结果显示广西毒株与国外固定毒株的L基因聚合酶活性部位的核苷酸和推定的氨基酸同源性分别为84.8%-87.5%和94.5%-99%,与类狂犬病病毒株的核苷酸和推定的氨基酸同源性分别为75.5%-79.2%和93.5%-97%,广西各毒株之间的核苷酸和推定的氨基酸同源性较高,分别为88.7%-99.8%和96.5%-100%。根据L基因聚合酶活性部位的核苷酸序列对广西狂犬病毒株作遗传进化分析,可以将广西毒株分成3个群,群Ⅰ:GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXHX、GXLA、GXSL、GXWX;群Ⅱ:GX01、GX074、GX219、GX304、GXPX、GXBM为;群Ⅲ:GXN119。比较了L基因聚合酶活性部位氨基酸的变异情况,广西毒株L基因聚合酶活性部位的特有变异为第660位、745位和771位,其中在L基因的第745位点上,广西毒株全部为精氨酸,而在该位点的国外参考毒株为丝氨酸、亮氨酸或组氨酸;在660位点上,广西毒株中GX01、GX074、GX219、GX304、GXPX和GXBM株为缬氨酸;771位点上,GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXHX、GXLA、GXSL和GXWX株为丙氨酸。比较L基因聚合酶活性部位,发现其4个基序高度保守,其中基序A保持不变;基序B、C、D只有少数氨基酸发生变异,基序C中的核心序列GDNQ在各毒株中都不变。
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