不同产地雪菊化学成分差异分析及其总黄酮纯化研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jingfei1415
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目的:建立雪菊的薄层色谱分析方法;研究维药雪菊中主要化学成分的分布特征及模式识别方法,为雪菊的品质评价和质量控制提供实验依据;建立柱前衍生高效液相色谱法测定雪菊中游离氨基酸含量;确定聚酰胺柱层析分离纯化雪菊总黄酮的工艺条件,建立纯化黄酮类的合理有效的纯化方法。方法:考察不同展开系统,不同点样量,不同薄层板,不同检视方式,不同温度,不同湿度对雪菊药材薄层色谱的影响;采用紫外分光光度法及ICP-MS法,测定新疆10批次、不同产地雪菊样品化学成分含量,运用主成分分析和聚类分析进行模式识别研究;采用异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,用C18ODS色谱柱(5um,250mmx4.6mm),梯度洗脱,柱温35℃,UV254nm波长处检测;比较3种聚酰胺对雪菊总黄酮的吸附量与解吸附量,并从上样药液pH值、上样浓度、最大吸附容量、洗脱溶剂的选择等方面进行了考察。结果:以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:4:2)为展开系统,雪菊药材薄层鉴别特征明显,专属性强;主成分分析选出3个主因子,得出雪菊特征成分为Mn、Ni、Fe、Pb、Cr、Al;聚类分析将10批药材聚为3大类,不同产地雪菊中主要成分的含量与气候,地理位置等生态环境存在着一定的相关性;测定18中氨基酸的线性范围分别为8~720ug/mL,r值均大于0.99,平均回收率分别为94.08%~105.3%;雪菊总黄酮最佳纯化工艺条件为:60-80目聚酰胺对雪菊总黄酮吸附与解析较好;清洗液最佳pH值为5;清洗液用量为2倍柱体积;乙醇用量11倍柱体积;乙醇浓度70%;径高比1:13;树脂比19:1;最大吸附容量为0.574g·g-1雪菊药材。在该纯化条件下,总黄酮含量有粗提物22.56%提高到68.04%。结论:该方法可行,重复性好,可作为雪菊药材的薄层鉴别方法;本文通过测定若干含量为指标,利用主成分分析和聚类分析法清晰地揭示了雪菊不同产地的规律性和差异性;柱前衍生化法对雪菊中的游离氨基酸含量进行了测定,操作简便,灵敏度高,结果准确可靠,可用于雪菊的质量控制;60-80目聚酰胺可较好地用于雪菊总黄酮的分离富集。
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