目的： 研究沈阳地区产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamases，ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布，为指导临床合理用药提供依据。 方法： 对2006年3月到10月间在中国医科大学附属一院和沈阳市传染病院临床分离的96株肺炎克雷伯菌用双纸片法进行ESBLs初筛，用CLSI推荐的确证方法进行ESBLs确证，用纸片扩散法进行药敏试验，之后采用基因库TEM-1、SHV-1及CTX-M-1通用引物进行PCR扩增，PCR产物进行1％将琼脂糖凝胶电泳，将片段利用TaKaRa凝胶回收试剂盒回收，将部分样品送到上海英俊公司进行自带引物测序。测序结果与基因库颁布的序列进行比较分析。 结果： 分离到产ESBLs菌株31株，检出率为32.3％。产ESBLs菌株多表现为多重耐药。产酶株的耐药率明显高于非产酶株。其中产ESBLs菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢呋辛、头孢唑林、头孢克洛、头孢噻肟和头孢曲松等7种抗生素的耐药率达到了100％；头孢吡肟、头孢他啶对ESBLs菌株仍保持较高抗菌活性。PCR初步分型结果表明TEM-1、SHV-1、CTX-M-1组基因扩增阳性率为58.1％、90.3％、16.1％。 结论： 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌除对亚胺培南敏感外，对其他抗生素的耐药性明显高于ESBLs阴性菌株。2006年3月-2006年10月间中国医科大学附属第一临床医院和沈阳市传染病院住院患者痰，血液，尿液，胸腹积液和各种创面分泌物中分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌31株，对质粒测序结果分析比对结果是TEM-1、SHV-1、CTX-M-1基因扩增阳性率分别为58.1％、90.3％、16.1％。产ESBLs肺炎克雷伯菌具有多个耐药基因和多种耐药酶。这种具有多种耐药酶的肺炎克雷伯菌的抗药性比单独产一种耐药酶的耐药性更强，也更加难以治愈，给临床的治疗带来了一定的困难，应引起临床高度重视。