【摘 要】
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非结构蛋白1（Nonstructural protein 1,NS1）是禽流感病毒的关键毒力因子,在病毒复制和增强毒力过程中起重要作用。NS1可与多种类型RNA和蛋白质相互作用,促进病毒复制和抑制宿主的抗病毒反应。我们前期研究显示,NS1可与人核仁磷酸化蛋白1（Nucleolar and coiled-body phosphoprotein 1,NOLC1）相互作用。NOLC1主要在参与核仁的发生
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非结构蛋白1（Nonstructural protein 1,NS1）是禽流感病毒的关键毒力因子,在病毒复制和增强毒力过程中起重要作用。NS1可与多种类型RNA和蛋白质相互作用,促进病毒复制和抑制宿主的抗病毒反应。我们前期研究显示,NS1可与人核仁磷酸化蛋白1（Nucleolar and coiled-body phosphoprotein 1,NOLC1）相互作用。NOLC1主要在参与核仁的发生、调节核仁蛋白和r DNA的转录等方面发挥重要作用。在病毒感染过程中,NS1与NOLC1的互作对促进宿主细胞凋亡和减少病毒复制有重要意义。据报道,负责端粒DNA保护的复合物成员端粒重复序列结合因子2（Telomeric repeat-binding factor 2,TRF2）与NOLC1蛋白相互作用。TRF2在部分细胞中以周期依赖的方式定位于细胞的核仁中,参与r RNA的合成,受NOLC1的调控。本研究旨在探究NS1与NOLC1蛋白互作对核仁TRF2和核仁应激下r RNA合成的影响。在本研究中,通过向A549细胞外源表达NS1基因,检测到NOLC1蛋白表达下降。在核仁应激条件下核糖体蛋白会由核仁易位到核质,激活p53通路。我们利用免疫共沉淀检测到在NS1表达的细胞中核糖体蛋白11与MDM2蛋白相互作用,降低了P53蛋白的降解,提高了p21基因表达。通过一系列实验证明NS1蛋白可导致核仁应激。免疫荧光显示在NOLC1表达下调和核仁应激的条件下,TRF2蛋白由核仁转移到核质。在NS1蛋白导致的TRF2核仁转移和核仁应激条件下,检测到宿主r RNA合成受到抑制。r RNA合成抑制的细胞通常会发生细胞周期阻滞,在表达NS1的细胞中利用流式细胞术检测到细胞周期阻滞在G1-G1/S期。探究NS1-NOLC1相互作用对宿核仁应激和TRF2蛋白核分布的影响,有助于我们深入研究病毒感染过程中毒力因子NS1如何干扰r RNA的转录来影响宿主细胞周期进程和病毒感染过程,拓展了NS1在病毒感染过程中的分子机制。
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