论文部分内容阅读
基因H19位于人的第11位染色体上,鼠的第7位染色体上,父源印迹,母源表达,其表达受到表观遗传学(DNA甲基化和组蛋白乙酰化)的共同调控。基因H19作为印迹基因在生物体的早期胚胎发育和细胞生理活动中起着重要的作用,包括细胞周期、细胞凋亡、细胞生长与分化等。研究发现Lnc RNA H19作为一种致癌基因,在癌症发生中具有重要作用。Lnc RNA H19在膀胱癌、乳腺癌、结肠癌和脑癌中均异常表达。此外,在癌症患者中,Lnc RNA H19的表达水平被认为是潜在的生物标志物。本实验旨在探究如何调控人肺癌细胞系A549中Lnc RNA H19的表达模式。本实验项目包括两个部分,分别探究了组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸(valporic acid,VPA)对于A549中Lnc RNA H19表达水平和DNA甲基化模式的影响。本研究发现Lnc RNA H19在A549肺细胞中异常表达,此外,与人293细胞差异甲基化区域(DMR)的半甲基化状态相比,基因H19表现为异常的去甲基化状态。采用小分子药物VPA处理A549细胞后利用荧光定量PCR进行检测,结果证明VPA在A549细胞中能够抑制Lnc RNA H19的表达,但不能够改变基因H19 DMR的低甲基化状态。本研究进一步探究Lnc RNA H19的表达与表观遗传学关键酶,甲基转移酶DNMTs和组蛋白去乙酰化酶HDACs之间的关系。实验结果显示在VPA处理的A549细胞中发现HDAC1和DNMT1的表达增加。此外,研究设计探究VPA处理后的细胞凋亡和细胞周期情况。实验结果表明,在A549细胞中VPA能够促进A549细胞发生凋亡并改变A549细胞周期进程。同时,本研究发现VPA能够促进A549细胞中P53凋亡蛋白的表达。研究数据表明Lnc RNA H19的表达在癌症发挥着重要作用,VPA可能通过抑制A549细胞中基因H19的表达诱导P53蛋白活化,从而促进细胞凋亡。综上所述,本研究结果表明VPA通过调控HDAC1和DNMT1抑制Lnc RNA H19的表达,并且Lnc RNA H19表达降低可以促进A549细胞凋亡并改变细胞周期。研究结果为肺癌的药物研究提供了潜在靶位点,同时也为深入解析基因H19在癌症中的作用提供了理论依据。