基于群体感应信号分子的抗生素对抗性质粒接合转移影响的研究

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抗生素是一把双刃剑,在显著提高医疗水平及畜牧业产量的同时,也会造成环境中抗性基因(ARGs)这一新兴污染物的富集。本文研究了多种抗生素、群体感应(QS)信号分子及其抑制剂(QSI)对RP4质粒接合转移的影响;并分别探究QS信号分子和QSI存在时,四环素(TH)对RP4质粒接合转移的影响。该研究对抗生素的生态风险评价有重要的指导作用,能够完善抗性基因的传播机制,并为抗性基因传播的控制提供理论依据。首先,以MG1655Nal为受体菌,分别与MG1655(R388)和MG1655(RP4)进行接合反应,经过比较,最终选择MG1655(RP4)作为抗性基因水平转移研究模型的供体菌。通过单因素分析,确定接合反应体系的条件为.:以pH7.0的LB液体培养基为介质,受体菌和供体菌在37℃条件下静置孵育8 h。其次,研究了各抗生素在其最小抑菌浓度(MIC)以下时对RP4接合转移的影响,结果如下:磺胺类抗生素(SAs)和甲氧苄啶(TMP)有抑制作用;四环素类抗生素(TCs)和卡那霉素(Km)有促进作用,且促进率均呈现先增后降的趋势;氨苄青霉素(Amp)无明显作用。从RP4介导的抗性基因水平转移方面看,SAs、TMP和Amp无生态风险;而TCs和Km能够促进抗性基因水平转移,具有明显的生态风险,其在排放物中的含量应受到监测。最后,研究了 C6和C8(两种I型QS信号分子)和R3P(一种QSI)对RP4接合转移的影响,并分析在这3种药物存在时,TH对RP4接合转移的影响。研究发现,亚抑制浓度的R3P能抑制RP4质粒的接合转移;而C6和C8对其均无显著影响。在TH对RP4接合转移的促进作用上,C8在低浓度时具有明显的增强效应,但在高浓度时具有减弱效应;C6具有减弱效应;R3P具有减弱效应,且随着浓度的升高,减弱程度越大,甚至出现RP4接合转移受到抑制的现象。最后结合本文及前人的研究结果,对抗生素及QS系统对抗性基因接合转移的调控模式进行预测。
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