小麦叶锈菌THTT在TcLr19及其感病突变体M433-3-11-2上差异表达分析

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lideqiang163com
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小麦叶锈菌引起的小麦叶锈病是世界范围内普遍发生、对经济影响最严重的小麦病害之一。开展小麦叶锈菌致病机制研究,对防治叶锈病,保障小麦安全生产具有重要意义。利用小麦抗叶锈近等基因系TcLr19及其感病突变体M433-3-11-2开展小麦与病原菌互作研究,对于揭示小麦叶锈菌致病机理具有重要意义。因此,本试验将叶锈菌株THTT的休眠夏孢子(BZ)、萌发芽管(MF)、THTT与TcLr19(R)和M433-3-11-2(M)互作早期(分别表注为RIQ和MIQ)和互作后期(分别标注为MI6d和RI6d)转录组进行RNA-seq测序。通过基因数字表达谱,分析基因表达水平,并在七大数据库(Nr,Nt,Pfam,KOG,Swiss-prot,KEGG,GO)进行功能注释。对差异表达基因,通过生物信息学分析来预测叶锈菌候选分泌蛋白,结合基因表达模式和功能,筛选出可能与致病相关的基因,为研究叶锈菌致病机制奠定基础。本试验主要结果如下:  1.小麦叶锈菌THTT通过Illumina HiSeqTM2000平台测序,叶锈菌休眠夏孢子、萌发夏孢子及与寄主互作的测序深度分别为8G、8G和12G。数字表达谱分析发现THTT在亲和互作和非亲和互作中差异表达丰富。在MF、MIQ和MI6d与BZ相比较,共同上调的基因100个,共同下调基因286个。MIQ与RIQ相比较,显著上调表达基因313个,下调表达基因3301个;MI6d与RI6d相比较,显著上调表达基因20928个,显著下调表达基因3159个。MI6d与MIQ相比较,显著上调表达基因17820个,下调表达基因2179个;RI6d与RIQ相比较,上调基因517个,下调表达基因5032个。在MIQ、RIQ和MI6d、RI6d共同上调表达基因151,共同下调表达基因2290个;MI6d、MIQ和RI6d、RIQ共同上调表达基因1个(Cluster-19789.81726),共同下调表达基因一个(Cluster-19789.97185)。  2.对差异表达基因进行GO功能富集,发现MIQ与RIQ相比较,差异基因主要富集在通道抑制子、萜类物质合成及纤维糖代谢和纤维糖氧化上,此外,涉及到大量的胞外区物质。MI6d与RI6d相比较,差异基因涉及生物学过程和细胞组分两大功能,包括细胞器、细胞代谢、氮素代谢、碱基复合物代谢以及分子功能中的核酸结合和阳离子结合。MI6d与MIQ相比较,差异基因主要富集在代谢过程、氮素代谢过程以及分子功能中的氧化还原活性、核酸结合和水解酶活性上。RI6d与RIQ相比较,差异基因主要富集在代谢过程、氮复合体代谢过程、氧化还原过程、胞外区和通道抑制子。  3.根据差异表达基因KEGG富集程度和基因功能,筛选出可能与致病相关的20个代谢通路。包括39个GPI相关基因,23个囊泡运输相关基因,140个糖酵解相关基因,113个ABC转运子基因等可能在叶锈菌中有重要作用。同时推测3个氨酸代谢基因(Cluster-19789.97938、Cluster-19789.101960、Cluster-19789.101958),4个果糖和甘露糖代谢相关基因(Cluster-19789.101603、Cluster-19789.97958、Cluster-19789.97685、Cluster-19789.93451),10个内吞作用基因可能为叶锈菌致病相关基因。  4.利用Signal P4.1、TMHMM2.0、Target P和Effector P对差异表达基因编码氨基酸序列进行效应蛋白预测,结果获得336个候选分泌效应蛋白。基因表达模式分析发现,这336个候选分泌蛋白分为三种类型,第一类,只在M433-3-11-2中表达,此类基因有109个。这些基因主要参与泛素介导的蛋白水解代谢、信号转导和泛素化生物过程;第二类,只在TcLr19上表达基因45个,主要参与蛋白质水解过程、离子通道抑制活性和核膜定位作用;第三类,在抗病寄主和感病寄主上均有表达的,共有182个基因。对Pfam结构域进行分析发现,效应蛋白多样性丰富,保守结构较少。  5.8个基因的定量分析结果与基因数字表达谱分析结果一致。表达模式有两种:Cluster-19789.73893、Cluster-19789.65598和Cluster-32222.0从BZ到THTT和寄主互作144h,基因上调表达;Cluster-19789.105186、Cluster-19789.110192、Cluster-19789.74609、Cluster-19789.68236和Cluster-19789.81277在192h前出现一个表达高峰后,其表达量出现了下调趋势。  综上所述,同一小麦叶锈菌与抗感不同的寄主互作,表现出复杂的作用机制。
其他文献
目的:调查社区居民分级诊疗认知度对就医方式影响.方法:选取200名社区居民(2015年11月—2017年5月)作为本次研究的研究对象,对其分级诊疗认知度进行分析,后统计社区居民就医
目的:研究分析在冠心病患者中开展系统健康教育的效果.方法:选取在本院接受治疗的冠心病患者,选取时间为2015年5月至2016年12月,病例数共计为190例.在入院后均接受系统健康教
陈慈煦教授在治疗脾胃病时,用药以轻、灵、平、和为要,每获良效,现代医学关于“脑-肠-菌轴”理论越来越受到临床的认可,而通过现代药理研究发现,陈老的用药思想与此理论相合,
毕业论文作为本科教育最后的教学环节,选题既能够反映出学生对本专业知识的掌握程度也能反映学生的兴趣,既是本科毕业论文的基础环节,也是决定毕业论文后续工作能否顺利开展
目的:分析供应室服务模式管理在手术室腔镜器械管理中的应用效果.方法:我院手术供应室2015年11月—2016年10月对腔镜器械未实施服务模式管理,2016年11月—2017年10月则实施了
目的:探究分析应用尿病教育对血糖控制所产生的影响.方法:选取100例糖尿病患者作为研究对象,随机将其分为对照组与观察组各50例,在对照组患者中应用常规治疗,观察组中在采用
在我国教育普及化程度不断提高的背景下,青少年厌学心理的出现受到广泛关注,成为教育改革过程中的重点问题.本文从青少年厌学成因入手,对有效实施心理辅导的措施进行了适当的
禾谷孢囊线虫病(Cereal Cyst Nematode, CCN, Heterodera avenae Wollenweber,1924)是为害大麦、小麦、燕麦等禾谷类作物的一种土传病害,严重影响了麦类的生产。自1989年我国