本文建立了尿样和血样中环境雌激素双酚A（BPA）、4—壬基酚（NP）、17α—乙炔基雌二醇（EE2）和内源性雌激素雌三醇（E3）、17α—雌二醇（E2-α）、17β—雌二醇（E2-β）的荧光衍生—高效液相色谱测定方法。在无水条件下,被测化合物与对硝基苯甲酰氯暗处反应生成荧光产物,最后用高效液相色谱—荧光法检测定量。对色谱柱的选择、流动相组成和比例、流速、柱温和荧光检测波长等实验条件进行优化,确定了最佳分析条件。色谱柱:Phenomenex（USA）,C18,5μm,250×4.6mm;柱温:25℃;流动相:乙腈—水;流速:1ml/min;洗脱梯度:0～12min乙腈含量从30%上升至70%,12～12.3min由70%快速升至100%,并保持至20min。采用波长切换,在0～8.4min,激发波长282nm,发射波长315nm,8.4min后激发波长切换为228nm,发射波长为316nm。本法检测限为2.7～8.3μg/L;相对标准差（RSD）为1.30%～4.88%,线性范围上限可达1.0×10⁴μg/L。 尿样先经盐酸水解,再通过固相萃取（SPE）柱富集净化、衍生化后测定。尿样加标回收率为75.4%～102.5%。 血清样品经乙腈沉淀蛋白后,加2.0ml水,1.0ml 1mol/L HCl和1.0ml甲醇,用8.0ml乙醚分三次萃取,N₂气流挥干溶剂、衍生化后测定。血清加标回收率为72.6%～98.6%。