亳菊脱病毒技术研究及其品质测定

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亳菊是一种药用价值极高的菊花,它的花含有腺嘌呤和类黄酮等成分,有疏风散热、清肝明目、解疮毒的作用,是药用和饮料兼用的中药材,也是出口创汇的主要产品。近年来,随着药用菊花功效的不断研制开发,市场对其数量、品种及品质的需求日益提高,但传统的繁殖方法以及靠自然变异选育新品种的途径繁殖系数偏低,工业化生产效率不高,已不能满足生产上的需要,特别是经多代增殖以后,常造成种性退化,甚至病毒积累,产量和品质大大下降。对于组织培养亳菊脱毒技术的研究是解决这一问题的关键技术。本实验以亳菊的茎尖为外植体,对外植体灭菌、丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根、炼苗移栽等过程中各个影响因素,以及热处理和未经热处理的移栽苗脱病毒情况及生理指标等进行了研究。研究的主要问题集中在基本培养基及培养方式的选择、不同激素配比、用量的选择、不同脱病毒技术的选择、生理指标等方面。主要采用正交设计安排组织培养试验。实验结果表明:1.以亳菊的茎尖做外植体,诱导丛生芽最适宜的培养基配方为:MS+6-BA3.0mgL-1+NAA0.2mgL-1+蔗糖40gL-1,该组合诱导率为75.0%,平均丛生芽数1.40。当茎尖不带叶原基,成活率很低仅为20%;当茎尖带2叶原基大小为1.0mm时,茎尖成活率可高达66.7%。2.影响亳菊丛生芽增殖的主要因素有细胞分裂素6-BA,生长素NAA和蔗糖。试验结果表明:亳菊继代增殖培养的最优组合是A1B1C1,即最适宜的培养基配方是MS+6-BA0.5mgL-1+NAA0.1mgL-1+蔗糖20gL-1,丛生芽增殖效果最好。3.在试验范围内,在培养基MS+NAA0.5mgL-1+蔗糖30gL-1中生根效果最佳。4.瓶苗移栽时,首先要经过5-6天的炼苗期,随后在室内通风荫凉处,空气湿度达到70%-80%的温室中移栽,小苗在沙与珍珠岩混合的基质中的成活率为100%,而且长势最好。5.对热处理、非热处理和未经处理亳菊的部分代谢指标进行了测定。结果表明:总黄酮、绿原酸和叶绿素含量三个生理指标有较明显差异,二次处理亳菊花中三个指标的均含量高于未处理的亳菊,说明各处理间代谢水平不尽相同。6.对热处理、非热处理和未经处理亳菊的花期花量和田间农艺性状进行了观察与测定。与未经处理的亳菊花相比,二次处理的亳菊开花早而且花期长,叶片增大;而且二次热处理的亳菊花头状花序直径增加,舌状花花瓣数增多,显示出较强的生长优势。7.采用直接观察法和指示植物法对二次热处理和二次非热处理亳菊中病毒进行了检测。结果表明:二次热处理样品中有1个带番茄不孕病毒(TAV),有3个带马铃薯Y病毒(PVY);而二次非热处理样品中有3个带番茄不孕病毒(TAV),有4个带马铃薯Y病毒(PVY)。
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