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沙门菌是一种胞内菌，既可以作为原核质粒的表达载体，也可以作为真核质粒的表达载体。其不仅具有制备简单、免疫方便、有较强的免疫原性等优势，而且其诱导的免疫反应更强更持久。鼠伤寒沙门菌作为沙门菌载体的研究应用比较广泛，但以其为载体携带外源抗原表达外源基因时，由于生存压力，其所携带的外源基因可能不能稳定遗传。最近研究的一种无抗性的宿主载体平衡致死系统为高效表达外源基因且无抗性标记提供了解决途径。asd(aspartic semialdehyde dehydrogenase)基因编码天冬氨酸β-半乳糖脱氢酶，该酶是合成二氨基庚二酸(diaminopimelic acid, DAP)的必需酶，在无外源DAP条件下，含asd基因的载体会与缺失asd基因的减毒菌株互补结合，否则，减毒菌株会溶菌死亡。研究内容主要包括：1.鼠伤寒沙门菌crp cya asdSL1344缺失株的构建及筛选以含有重组自杀性质粒χ7213(pREΔasd)为供体菌， crp cyaSL1344为受体菌，利用重组自杀性质粒介导细菌基因等位交换的作用，两步法筛选出蔗糖抗性（SUCr）及DAP依赖菌落，并通过PCR及测序鉴定，确定构建成功。2.缺失株ΔcrpΔcya asdSL1344与其它菌株生物学特性的比较研究缺失株ΔcrpΔcya asdSL1344的血清型与亲本株crp cyaSL1344及强毒株SL1344相同，均为1,4,5,12:i:1,2；缺失株ΔcrpΔcya asdSL1344能稳定遗传缺失后的asd基因；缺失株ΔcrpΔcya asdSL1344的生化特性及生长速度与强毒株SL1344相比有很大差异，但与亲本株crp cyaSL1344基本保持一致，缺失株ΔcrpΔcya asdSL1344失去了利用麦芽糖、乳糖、山梨醇等碳源的能力，也不能分解H2S、半乳糖和鼠李糖，但仍保留了利用葡萄糖的能力，缺失株ΔcrpΔcya asdSL1344的生长速度比强毒株更加缓慢，但与亲本株crp cyaSL1344相差不大；1日龄雏鸡攻毒试验表明ΔcrpΔcya asdSL1344互补携带asd基因的pYA3493质粒后，重组菌株ΔcrpΔcya asdSL1344(pYA3493)毒力较强毒株SL1344降低了至少105倍，与亲本株ΔcrpΔcyaSL1344相比毒力仅相差10倍，初步说明其作为疫苗活载体具有良好的安全性。