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本文从以下几部分进行论述: 第一部分 雷帕霉素对中枢炎症小鼠学习记忆功能的影响 目的:评价腹腔注射雷帕霉素对中枢炎症小鼠学习记忆能力的影响。 方法:C57雄性成年小鼠126只,随机分为对照组(C组,N=42)、LPS脑室注射组(L组,N=42)、雷帕霉素腹腔注射组(R组,N=42),L组、R组侧脑室单次注射2μg脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立中枢炎症的学习记忆障碍模型,R组建模前3天每天给予腹腔注射雷帕霉素0.5mg/kg,术后1,2,3天利用条件恐惧实验检测小鼠学习记忆能力,ELISA检测小鼠海马组织炎症因子IL-13、TNF-α蛋白表达水平。 结果:LPS侧脑室注射术后第1,2,3天,L组与C组比较,小鼠的僵直比下降(P<0.01),R组与L组比较,小鼠的僵直比R组高于L组(P<0.01);LPS侧脑室注射术后第1,2,3天,L组与C组比较,小鼠海马组织IL-1β、TNF-α含量明显升高(P<0.01),但R组与L组比较,小鼠海马组织IL-1β、TNF-α含量升高程度低于L组(P<0.01)。 结论:雷帕霉素可以抑制C57小鼠的中枢炎症反应,改善小鼠的学习记忆能力。 第二部分 mTOR信号通路在中枢炎症小鼠学习记忆功能障碍中的作用 目的:mTOR信号通路在中枢炎症小鼠学习记忆功能障碍中的作用。 方法:C57雄性成年小鼠156只,将108只C57小鼠随机分成空白对照组(Nctrl组,N=36),LPS溶液对照组(sham组,N=36),LPS脑室注射组(LPS组,N=36),LPS组给予脑室注射2000ng LPS,sham组给予脑室注射等量的人工脑脊液,Nctrl组不做处理。在术后1,2,3天,每组随机抽取6只进行条件恐惧实验检测海马相关的学习记忆功能,另外6只行颈椎脱臼法处死,取海马组织,用ELISA方法测量海马组织IL-1β、TNF-α、Aβ含量,westernblot方法测量p-mTOR、p-P70S6K、p-Tau含量;另将48只C57小鼠随机分为空白对照组(ctrl组,N=12),雷帕霉素对照组(ctrl+RAPA组,N=12),LPS脑室注射组(LPS组,N=12),雷帕霉素组(LPS+RAPA组,N=12),LPS组和LPS+RAPA组给予脑室注射2μg LPS,ctrl+RAPA组和LPS+RAPA组在脑室注射前3天每天腹腔注射0.5mg/kg雷帕霉素,ctrl+RAPA组术前3天每天注射与雷帕霉素等量的DMSO溶剂,ctrl组不做处理。在术后第1天,每组随机抽取6只进行条件恐惧实验检测海马相关的学习记忆功能,另外6只行颈椎脱臼法处死,取海马组织,用ELISA方法测量海马组织IL-1β、TNF-α、Aβ含量,westernblot方法测量p-mTOR、p-P70S6K、p-Tau。 结果:与Nctrl组比较,LPS注射后第1,2天,LPS组小鼠的僵直比降低(P<0.05)、小鼠海马组织的TNF-α、IL-1β浓度升高(P<0.05)、小鼠海马组织的p-mTOR、p-P70S6K、p-Tau、Aβ蛋白含量升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+RAPA组在LPS组注射后的第1天小鼠的僵直比有所提高,海马组织TNF-α、IL-1β浓度有所降低,(P<0.05),小鼠海马组织p-mTOR、p-P70S6K、p-Tau、Aβ蛋白含量有所降低,有统计学差异(P<0.05)。 结论:mTOR信号通路参与了中枢炎症导致的认知功能障碍,被雷帕霉素阻断后可以减少小鼠海马内Aβ蛋白沉积和Tau蛋白聚集,改善学习记忆能力。