MUC1及MUC2在HIV感染者肠粘膜屏障表达的研究

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目的:对比无症状HIV感染者、AIDS期患者及健康者三组人群肠粘膜组织病理学及肠粘膜粘蛋白1(MUC1)及粘蛋白2(MUC2)表达水平的差异。探究MUC1及MUC2在HIV感染病程中的变化,研究其与肠粘膜屏障损伤的关系。方法:按照相应的纳入与排除标准,入组人群划分为A组,B组及C组。A组为健康组,B组为无症状HIV感染组,C组为AIDS期组。于结肠镜下采集所有入组对象的结肠粘膜组织标本,采用HE染色法观察结肠粘膜的基本组织病理情况,行PAS染色观察结肠粘膜中杯状细胞形态及数量的变化,采用免疫组织化学、蛋白质印迹及实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-q PCR)分别评估肠粘膜MUC1及MUC2的表达情况。用SPSS25.0软件对三组人群的基本信息,组织病理数据,杯状细胞计数,MUC1及MUC2的免疫组化、蛋白印迹及RT-q PCR指标的组间差异及相关性进行分析,当P<0.05时提示差异具有统计学意义。结果:1.组织病理:同A组相比,B组及C组结肠粘膜炎症细胞浸润明显(P<0.001);对比B组,C组结肠粘膜可见溃疡形成,淋巴细胞浸润明显增加,结肠粘膜腺体间隙增宽,变形、坏死增加(P=0.035)。2.细胞免疫水平:B组及C组的CD4+T细胞数均低于A组(P=0.037,P<0.001),且B组明显低于C组(P=0.002)。3.杯状细胞:同A组相比,B组及C组的杯状细胞的大小不均一,形态不规则,排列不整齐。B组及C组的杯状细胞数均低于A组(P=0.044,P<0.001),且B组杯状细胞数量低于C组(P=0.015)。4.MUC1表达情况:(1)免疫组化:同A组相比,MUC1在B组及C组结肠粘膜组织的表达均降低(P=0.038,P<0.001),B组及C组之间比较,差异无统计学意义(P=0.278);(2)蛋白印迹:同A组相比,MUC1在B组及C组结肠粘膜组织的表达均降低(P=0.021,P<0.001),B组及C组之间比较,差异无统计学意义(P=0.624);(3)RT-q PCR:同A组相比,MUC1m RNA在B组及C组结肠粘膜组织的表达均降低(P<0.001,P<0.001),B组及C组之间比较,差异无统计学意义(P=0.061)。5.MUC2表达情况:(1)免疫组化:同A组相比,MUC2在B组及C组结肠粘膜组织的表达均降低(P=0.039,P<0.001),且B组低于C组(P=0.012);(2)蛋白印迹:同A组相比,MUC2在B组及C组结肠粘膜组织的表达均降低(P=0.014,P<0.001),且B组低于C组(P=0.045);(3)RT-q PCR:同A组相比,MUC2 m RNA在B组及C组结肠粘膜组织的表达均降低(P<0.001,P<0.001),且C组低于B组(P<0.001)。6.细胞免疫水平同杯状细胞之间相关性:CD4+T细胞数同杯状细胞数之间呈正相关关系(P<0.001,r=0.568)。7.细胞免疫水平同MUC1之间相关性:CD4+T细胞数同MUC1的表达在免疫组化、蛋白印迹及RT-q PCR结果均呈正相关关系(P<0.001,r=0.567;P<0.001,r=0.636;P<0.001,r=0.650)。8.细胞免疫水平同MUC2之间相关性:CD4+T细胞数同MUC2的表达在免疫组化、蛋白印迹及RT-q PCR结果均呈正相关关系(P<0.001,r=0.618;P<0.001,r=0.581;P<0.001,r=0.765)。9.杯状细胞数同MUC1之间相关性:杯状细胞数同MUC1的表达在免疫组化、蛋白印迹及RT-q PCR结果均呈正相关关系(P<0.001,r=0.308;P<0.001,r=0.445;P<0.001,r=0.323)。10.杯状细胞数同MUC2之间相关性:杯状细胞数同MUC2的表达同免疫组化、蛋白印迹及RT-q PCR结果均呈正相关关系(P<0.001,r=0.595;P<0.001,r=0.537;P<0.001,r=0.590)。结论:1.同健康者相比,HIV感染者肠粘膜出现明显的炎症性改变,随着病程进展,肠粘膜损伤明显加重,主要表现为炎症细胞浸润增加,肠上皮细胞坏死脱落增加,肠腺数量减少,坏死增加,杯状细胞数量减少,粘膜固有层坏死,粘膜肌层断裂。2.杯状细胞及MUC2可能参与了HIV感染者疾病发展过程中肠粘膜屏障损伤。3.MUC1可能参与了HIV感染初始阶段的肠粘膜屏障损伤。4.细胞免疫水平同肠粘膜杯状细胞数量、MUC1及MUC2的表达水平密切相关。
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