论文部分内容阅读
背景和目的:近年来,对IgA肾病(IgAnephropathy,IgAN)分子无创标志物的研究成为热点。尿液因其无创、来源方便,获取简单,更是为寻求无创分子标志物来源的热点。课题组前期通过使用Raybiotech蛋白芯片筛选,发现IgA肾病组尿上清angiostatin、lyve-1是IgAN表达差异生物标志物。Angiostatin是纤溶酶原的蛋白水解片段,是抑制血管生成作用的最强因子,在非糖尿病肾病患者和动物模型中均发现其水平升高。Lyve-1是淋巴管内皮细胞透明质酸受体1,是淋巴内皮特异标志物,与肿瘤转移相关,在淋巴透明质酸(hyaluronic acid,HA )转运中起作用。在IgA肾病中HA主要沉积在肾乳头、新月体及损伤肾小管周围,并与蛋白尿、肌酐清除率及肾功能恶化程度相关,lyve-1在肾脏损伤过程中在HA的过表达中发挥的作用值得进一步研究。本研究通过扩大样本量,检测IgAN尿上清angiostatin、lyve-1的水平,明确尿angiostatin、lyve-1在评估IgAN疾病严重程度上的价值。方法:共纳入肾穿刺活检诊断为IgAN患者190例为IgAN组,非IgAN疾病对照组(disease control,DC)患者173例,健康对照组40例。其中177例IgAN患者样本用于检测尿上清angiostatin水平,107例IgAN患者样本用于检测尿上清lyve-1水平,两者重合IgAN患者样本94例。其中157例DC组患者样本用于检测尿上清angiostatin水平,46例DC组患者样本用于检测尿上清lyve-1水平,两者重合DC组患者样本30例。使用酶联免疫吸附实验技术检测尿上清angiostatin、lyve-1浓度。对IgAN患者进行随访,评价尿angiostain与lyve-1反映疾病严重程度和预后的价值。结果:将尿上清angiostatin、lyve-1水平进行尿肌酐浓度校正,单位分别为ng/mg、 pg/mg 表示,发现 IgAN 组 angiostatin (113.38(51.00,327.64) vs 620.61(126.00,1644.93), P<0.001)、 lyve-1 (634.5 ( 371.78,908.64 ) vs 888.37(569.82,1563.65),P<0.01)显著低于 DC 组。对IgAN组患者进行CKD分期,比较不同CKD分期组间尿angiostatin与lyve-1水平差异,发现IgAN组CKD3期以上患者尿angiostatin水平显著高于CKD1 期(CKD3 期:182.68(70.38, 466.12) vsCKD1 期:82.15(34.80, 147.28),P<0.01; CKD4 期:275.81(211.08,521.24)vs CKD1 期:82.15(34.80,147.28),P<0.001),CKD1期和CKD2期组间差异无统计学意义;IgANCKD4期患者尿lyve-1 水平高于 CKD1 期(849.059684.27, 1363.38) vs 527.80(220.27, 682.04),P<0.01)。而DC组患者不同CKD分组间尿angiostatin、lyve-1水平差异无统计学意义。根据Lee氏分级对IgAN进行分组发现,IgAN肾病Lee氏分级Ⅳ-Ⅴ级组尿上清 angiostatin 水平显著高于 Lee 氏分级 Ⅰ-Ⅱ 级组(220.14 (93.25,561.78) vs 44.11(29.07,247.53) ng/mg,P<0.01)和 Ⅲ 级组( 220.14 (93.25,561.78) vs 73.68(39.14,196.28),P<0.001),Lee 氏分级 Ⅰ-Ⅱ 级组和 Ⅲ 级组间尿 angiostatin 水平差异无统计学意义。IgAN肾病Lee氏分级Ⅳ-Ⅴ级组尿上清lyve-1水平显著高于Lee 氏分级 Ⅲ 级组(733.35 (509.46,961.20) vs 446.11 (201.54,772.29),P<0.01),其余各组间尿lyve-1水平差异无统计学意义。根据牛津分型对IgA肾病患者按系膜增生(M)、内皮增生(E)、节段硬化/球囊粘连(S)、小管坏死/间质纤维化(T)病变进行分组分析,M1组患者尿angiostatin水平高于M0组(192.30(71.82,545.25) vs 88.16(42.00, 223.37) ng/mg,P<0.01), lyve-1 水平在两组间差异无统计学意义,与 T0 组(66.75 (34.17,211.46))相比,T1 组(103.75 (63.64,198.59),P<0.05)和 T2 组尿 angiostatin 水平(247.53(103.75,589.02), P＜0.001)明显升高;T2 组尿lyve-1 水平明显高于 T0 组(754.23 (561.48,1048.69) vs 474.16 (218.77,729.05),P<0.01),其余各组间差异无统计学意义,E、S病变评分分组组间差异未见统计学意义。进一步比较IgAN组患者尿上清angiostatin、lyve-1水平与临床病理指标相关性,发现尿angiostatin、lyve-1水平与eGFR成负相关,与U-Prot、肾小球硬化的比例正相关成正相关。为了确定影响尿angiostatin、lyve-1水平的临床病理因素,我们使用多重线性回归模型。发现24h蛋白尿排泄量、性别、肾小管萎缩和间质纤维化程度与尿angiostatin水平的独立危险因素,24h蛋白尿排泄量、性别为影响尿lyve-1水平的独立危险因素。为了评估尿上清angiostatin、lyve-1水平对IgAN中疾病进展的预后作用,我们根据IgAN患者angiostatin、lyve-1中位数将IgAN患者分成两组,结果显示尿上清angiostatin>109.55ng/mg者肾脏预后较差(P<0.01);而根据尿上清lyve-1分组,两组患者预后差异无统计学意义。结论:IgA肾病患者临床病理表现较重者尿上清angiostatin、lyve-1水平高,说明尿上清angiostatin、lyve-1能够反映疾病严重程度。尿angiostatin水平高者预后较差。综上所述,尿上清angiostatin、lyve-1有可能反映IgA肾病病情严重程度,并且尿angiostatin反映疾病预后情况,尿上清angiostatin可作为重度IgA肾病无创标志物。