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背景抽动-秽语综合征(Tourette’s syndrome, TS),又称为小儿多发性抽动症(Multiple tics, MT),是一种儿童期起病的慢性的复杂的神经、精神障碍性疾病。临床表现以头面、腹部及四肢不自主抽动、伴喉部不自主的发出奇特叫声或詈骂不避亲疏为特征,可合并强迫障碍(OCD)、注意力缺陷与多动障碍(ADHD)、情绪障碍、学习障碍等。TS抽动症状可因转移注意力(如玩游戏机或看动画片)而减轻,也因紧张、兴奋、疲劳、发热等而加重,症状于睡眠时消失。TS的病因和发病机制至今尚不明确。绝大多数学者认为TS患者存在中枢神经递质的代谢异常,其中,5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)系统功能异常在TS发病中的重要作用正逐渐引起人们重视。TS病程较长,少部分患者抽动症状会持续至青春期以后,甚至终生不愈,故早期进行有效的治疗非常必要。长期以来,TS的治疗主要为口服以氟哌啶醇为代表的抗精神病类药物,但由于治疗周期长、不良反应大,不能被所有患儿及其家长接受,故开发研究临床上安全有效的新型治疗药物已成为当务之急。宁动颗粒是导师多年来治疗TS的验方,其作为安全有效的中药复方制剂已应用于临床多年,特别是对TS伴发的强迫障碍疗效肯定。本研究主要是在课题组前期研究的基础上进一步探讨宁动颗粒治疗TS的作用机制,为宁动颗粒在临床上治疗TS提供科学实验理论依据。目的1.观察TS模型大鼠的行为学改变和纹状体5-HT系统的变化。2.观察宁动颗粒对TS模型大鼠的行为学表现和纹状体5-HT系统的影响,探讨宁动颗粒治疗TS的作用机制。方法雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组,每组10只：(1)空白对照组(Control);(2)模型组(IDPN);(3)宁动颗粒低剂量组(NGL)；(4)宁动颗粒高剂量组(NGH)；(5)氟哌啶醇对照组(Hal)。采用亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射制作TS大鼠模型：除空白对照组外,余大鼠均按150mg.kg-1.d-1腹腔注射IDPN,空白对照组给予等量无菌生理盐水腹腔注射,每天一次,连续注射7天。造模成功后,NGL组给予宁动颗粒250mg.kg-1.d-1; NGH组给予宁动颗粒370mg.kg-1.d-1; Hal组给予氟哌啶醇10mg.kg-1.d-1;空白对照组及IDPN组分别给予等量蒸馏水。各组大鼠均灌胃给药,每日8：00-10：00a.m.给药一次,连续给药8周。观察动物行为学改变并评分。末次灌胃给药并在行为学观察结束后,5%水合氯醛0.7m1/100g腹腔注射麻醉,0.9%生理盐水快速灌注,断头处死,迅速于冰上剥离出双侧纹状体,液氮速冻后转移至-80℃冰箱冻存备用。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠纹状体内5-HT、5-HIAA含量,并利用实时定量荧光PCR技术(RT-PCR)检测纹状体中5-HT1AR和SERT的基因表达量。所有数据采用SPSS17.0分析软件(version17.0, SPSS Inc. USA)进行统计分析,服从正态分布的计量资料以均数士标准差(X±S)表示,组间差异的比较采用方差分析或者两两比较的t检验；P<0.05表示差异有统计学意义。结果1.治疗前后大鼠刻板行为指标比较连续灌胃治疗8周后,NGL组、NGH组和Hal组大鼠刻板行为指标较治疗前明显下降,与同期IDPN组相比明显减少(P<0.01)。2.大鼠纹状体中5-HT含量的比较IDPN组大鼠纹状体内5-HT含量显著高于空白对照组(5.90±0.34vs5.09±0.35ng/ml, P<0.01).与IDPN组相比,NGL组含量升高不明显(6.17±0.44vs5.90±0.34ng/ml, P>0.05); NGH组和Hal组5-HT含量显著上升(6.48±0.40vs5.90±0.34ng/ml;6.46±0.40vs5.90±0.34ng/ml, P<0,01)。3.大鼠纹状体中5-HIAA含量的比较IDPN组大鼠纹状体5-HIAA含量明显高于空白对照组(0.99±0.09vs0.68±0.07ng/ml, P<0.05)。与IDPN组相比,NGL组、NGH组和Hal组大鼠纹状体5-HIAA含量均明显降低(0.91±0.08vs0.99±0.09ng/ml;0.89±0.08vs0.99±0.09ng/ml;0.89±0.09vs0.99±0.09ng/ml, P<0.05)。4.大鼠纹状体5-HT1AR mRNA表达水平IDPN组大鼠纹状体内5-HT1AR mRNA表达显著低于空白对照组(0.60±0.12vs1.00±0.00,P<0.01)。与IDPN组相比,NGL组、NGH组和Hal组5-HT1AR mRNA表达均进一步下降(0.41±0.09vs0.60±0.12;0.23±0.07vs0.60±0.12;0.29±0.05vs0.60±0.12, P<0.01).5.大鼠纹状体SERT mRNA表达水平IDPN组大鼠纹状体SERT mRNA表达显著低于空白对照组(0.59±0.13vs1.00±0.00, P<0.01). NGL组、NGH组和Hal组与IDPN组相比SERT mRNA表达均呈显著下降(0.44±0.14vs0.59±0.13, P<0.05;0.26±0.09vs0.59±0.13,P<0.01;0.34±0.08vs0.59±0.13,P<0.01)。结论1.宁动颗粒具有显著抑制TS模型大鼠刻板行为的作用。2. IDPN诱导的TS模型大鼠存在纹状体5-HT系统功能反馈性上调,但其活性增强仍相对不足。3.初步阐明了宁动颗粒治疗TS是通过增强纹状体内5-HT能系统活性、改善其功能相对不足的分子作用机制。