17β-HSD10对于多种底物具有催化作用,现已证实,该酶参与3-羟基辅酶A、异亮氨酸、性激素和神经激素的新陈代谢过程。此外,17β-HSD10还参与大脑认知活动,在阿尔茨海默病(AD)患者和AD小鼠模型的脑中都检测到17β-HSD10的大量表达,预示着该蛋白作为诊断阿尔茨海默病的生物标志物的开发价值。本文采用RT-PCR克隆得到小鼠肝脏17β-HSD10基因,构建了该基因的原核表达体系pET-15b-17β-HSD10/E.coli BL21(DE3), IPTG诱导重组蛋白表达并优化表达条件；目的蛋白用His-Binding-resin纯化柱进行纯化,并免疫BALB/c小鼠和新西兰大耳白兔,免疫血清总IgG采用硫酸铵沉淀法纯化,用获得的高效价鼠源和兔源两种多克隆抗体,建立17β-HSD10双抗夹心酶联免疫检测方法(ELISA)。最终表达的蛋白分子量约为29.5kDa,纯化后浓度为1.5mg/mL,鼠源和兔源多克隆抗体效价分别为1.25×104和2.5×104,建立的检测方法对于多种羟基类固醇脱氢酶无交叉反应,特异性良好,可检出的阳性血清含量约为0.1μg/mL,具有较高的灵敏性。本文建立了一种更加快速,简便的17β-HSD10ELISA检测方法,为阿尔茨海默病的诊断提供基础。